ໂປຣ
ຜະລິດຕະພັນ
Dnase assay Kit (Fluorescence) HCP0034A ຮູບພາບທີ່ໂດດເດັ່ນ
  • ຊຸດທົດສອບ Dnase (Fluorescence) HCP0034A

ຊຸດທົດສອບ Dnase (Fluorescence)


ໝາຍເລກແມວ: HCP0034A

ການຫຸ້ມຫໍ່: 48T / 96T

ຊຸດກວດຫາ DNase ແມ່ນອີງໃສ່ການສຳຫຼວດ DNA ທີ່ມີປ້າຍກຳກັບ fluorophore.

ລາຍ​ລະ​ອຽດ​ຜະ​ລິດ​ຕະ​ພັນ

ຂໍ້ມູນຜະລິດຕະພັນ

ຊຸດກວດຫາ DNase ແມ່ນອີງໃສ່ການສຳຫຼວດ DNA ທີ່ມີປ້າຍກຳກັບ fluorophore.ເມື່ອຕົວຢ່າງບໍ່ມີກິດຈະກໍາ DNase, probe ມີຄວາມຫມັ້ນຄົງແລະບໍ່ຜະລິດສັນຍານ fluorescent;ເມື່ອຕົວຢ່າງມີກິດຈະກໍາ DNase, probe ໄດ້ຖືກທໍາລາຍ, ສົ່ງຜົນໃຫ້ສັນຍານ fluorescence ປັບປຸງເທື່ອລະກ້າວ;ອັດຕາການເພີ່ມຂື້ນຂອງສັນຍານ fluorescence ແມ່ນກ່ຽວຂ້ອງໃນທາງບວກກັບຈໍານວນແລະກິດຈະກໍາຂອງ enzymes.ໃຊ້ຕົວອ່ານ microplate fluorescence ເພື່ອວັດແທກຄວາມຍາວຄື່ນຂອງ ex/em=485/525nm ເພື່ອກໍານົດວ່າຕົວຢ່າງຖືກປົນເປື້ອນໂດຍ DNase.


  • ທີ່ຜ່ານມາ:
  • ຕໍ່ໄປ:

  • ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ

    ຊຸດນີ້ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອກວດຫາການປົນເປື້ອນ DNase ໃນຕົວຢ່າງ.

     

    Cອົງປະກອບ

    ຊື່

    HCP0034A-01

    (192T)

    HCP0034A-02

    (48T)

    10× ການ​ແກ້​ໄຂ​ຕິ​ກິ​ຣິ​ຍາ​

    2.0ml

    0.5 ມລ

    ການສືບສວນ DNA

    1 ທໍ່

    1 ທໍ່

    TE buffer

    2.0ml

    0.5 ມລ

    ມາດຕະຖານ DNase I (2U/μL)

    20μL

    10μL

    ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    12 ມລ

    6 ມລ

    ນ້ຳທີ່ບໍ່ມີ DNase ແລະ RNase

    25 ມລ

    25 ມລ

    DNase RNase ໄປ

    50ml

    50ml

     

    ການເກັບຮັກສາແລະຄວາມຫມັ້ນຄົງ

    1.ການຂົນສົ່ງໃນ -25 ~ - 15 ℃;

    2.ອົງປະກອບທີ່ແຕກຕ່າງກັນຂອງຊຸດໄດ້ຖືກເກັບຮັກສາໄວ້ແຍກຕ່າງຫາກຕາມອຸນຫະພູມ:

    ຊື່

    ອຸນ​ຫະ​ພູມ

    10× ການ​ແກ້​ໄຂ​ຕິ​ກິ​ຣິ​ຍາ​

    -25 ~ – 15 ℃​

    ການສືບສວນ DNA

    -25 ~ – 15 ℃​

    TE buffer

    -25 ~ – 15 ℃​

    ມາດຕະຖານ DNase I (2U/μL)

    -25 ~ – 15 ℃​

    ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    -25 ~ – 15 ℃​

    ນ້ຳທີ່ບໍ່ມີ DNase ແລະ RNase

    -25 ~ 30 ℃​

    DNase RNase ໄປ

    2 ~ 30 ℃​

    1. ເກັບຮັກສາຊຸດທີ່ບໍ່ໄດ້ເປີດໄວ້ເປັນເວລາ 12 ເດືອນ.

    2.ເກັບຮັກສາຊຸດສໍາລັບ 6 ເດືອນຫຼັງຈາກເປີດ.ມັນໄດ້ຖືກແນະນໍາໃຫ້ aliquot ການແກ້ໄຂ DNA probe ອີງຕາມປະລິມານການນໍາໃຊ້ດຽວເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການແສງສະຫວ່າງແລະການແຊ່ແຂໍງຊ້ໍາແລະ thawing.

     

    ອຸປະກອນທີ່ຕ້ອງການແລະເຄື່ອງບໍລິໂພກ

    1.ເຄື່ອງອ່ານຈຸນລະພາກ fluorescence (ລວມທັງ ex/em=485/525nm wavelength)

    2.pipettes ທີ່ບໍ່ມີ DNase&RNase ແລະຄໍາແນະນໍາ

    3.ທໍ່ EP ທີ່ບໍ່ມີ DNase&RNase

    4.ແຜ່ນ 96-ດີ ສີດໍາທີ່ບໍ່ມີໂປ່ງໃສ DNase&RNase

    ການກະກຽມ Reagent

    1.ເອົາຊຸດອອກແລະສົມດຸນກັບອຸນຫະພູມຫ້ອງ (18 ~ 25 ℃), ສັ່ນແລະປະສົມອົງປະກອບເຊັ່ນ: 10 ×ຕິກິຣິຍາ, TE buffer, ມາດຕະຖານ DNase I (2U / μL), ມາດຕະຖານ Dilution Buffer, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນ centrifuge ທັນທີ.(centrifuge ຢູ່ 4000 ~ 7000rpm ສໍາລັບ 10 ວິນາທີ).

    2.Centrifuge the DNA probe at 4000 ~ 7000rpm ເປັນເວລາ 60 ວິນາທີເພື່ອລວບລວມມັນຢູ່ດ້ານລຸ່ມຂອງທໍ່, ເປີດຝາທໍ່ຢ່າງລະມັດລະວັງ, ແລະເພີ່ມ 40μL TE buffer ເພື່ອລະລາຍເປັນການແກ້ໄຂການເກັບຮັກສາ DNA probe, aliquot ການແກ້ໄຂການເກັບຮັກສາ DNA probe ອີງຕາມການ ປະລິມານການນໍາໃຊ້ຄັ້ງດຽວແລະເກັບຮັກສາໃຫ້ເຂົາເຈົ້າຢູ່ທີ່ -25 ~ -15 ° C ເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການແຊ່ແຂງຊ້ໍາແລະ thawing.ເອົາການແກ້ໄຂການເກັບຮັກສາ probe ໃນແຕ່ລະຄັ້ງທີ່ທ່ານທົດສອບ, ເຈືອຈາງມັນ 50 ເທື່ອດ້ວຍ TE buffer (ຕົວຢ່າງ, ເພີ່ມ 490μL TE buffer ເຂົ້າໄປໃນ 12μL DNA probe) ເປັນການແກ້ໄຂການເຮັດວຽກຂອງ DNA probe.ເກັບຮັກສາສ່ວນທີ່ເຫຼືອຂອງ DNA probe ການແກ້ໄຂການເຮັດວຽກຢູ່ທີ່ -25 ~ -15 ° C ເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການແສງສະຫວ່າງແລະການແຊ່ແຂງຊ້ໍາແລະ thawing.

     

    ຂັ້ນຕອນການກວດຫາ

    1.ຂັ້ນຕອນເພື່ອກໍານົດການໄດ້ຮັບທີ່ເຫມາະສົມກ່ອນການທົດສອບຄັ້ງທໍາອິດ, ເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການຄວາມສ່ຽງຂອງການສູນເສຍຄວາມອ່ອນໄຫວຫຼື oversaturation ສັນຍານ.

    1​) ຕົວ​ກໍາ​ນົດ​ການ​ເຄື່ອງ​ມື​:

    ແຜ່ນສັ່ນ 10 ~ 15s ກ່ອນທີ່ຈະກວດພົບ;

    ຄວາມຍາວຄື້ນຄວາມຕື່ນເຕັ້ນ λEx=485nm;

    ຄວາມຍາວຄື້ນການປ່ອຍອາຍພິດ λEm=525nm;

    ໃຊ້ຟັງຊັນການເພີ່ມອັດຕະໂນມັດ;

    ອຸນຫະພູມ 37 ℃;

    ໂໝດຈຸດສິ້ນສຸດ.

    ຕັ້ງຄ່າການເພີ່ມຂະໜາດອັດຕະໂນມັດຖ້າເປັນໄປໄດ້, ຫຼືໃຊ້ການຕັ້ງຄ່າການເພີ່ມຂະໜາດກາງໃນເບື້ອງຕົ້ນ.

    ຫມາຍເຫດ: ວິທີການຕັ້ງຂອງເຄື່ອງມືທີ່ແຕກຕ່າງກັນແມ່ນບໍ່ສອດຄ່ອງ, ກະລຸນາປຶກສາຜູ້ສະຫນອງເຄື່ອງມືສໍາລັບລາຍລະອຽດ.

    2) ເລືອກເອົາ 2 ຂຸມໃນແຜ່ນ 96 ທີ່ດີ, ເພີ່ມການແກ້ໄຂການເຮັດວຽກຂອງ DNA probe 10μL ແລະການແກ້ໄຂ 10μL 10 × ແຕ່ລະນ້ໍາ;

    3) ຕື່ມນ້ຳທີ່ບໍ່ມີ DNase&RNase 80μLໃສ່ນ້ຳສ້າງໜຶ່ງ, ແລະຕື່ມນ້ຳທີ່ບໍ່ມີ DNase&RNase 79μL ແລະ 1μL DNase I standard (2U/μL) ໃສ່ນ້ຳສ້າງອື່ນ.

    4) ເອົາແຜ່ນໃສ່ບ່ອນມືດທີ່ອຸນຫະພູມ 37 ອົງສາ ແລະ ທົດສອບພາຍຫຼັງ 30 ນາທີ.

    5) ຖ້າຕັ້ງການຮັບເປັນອັດຕະໂນມັດ, ຄ່າ Gain ຈະຖືກສະແດງຢູ່ໃນແຖບຕົວກໍານົດການເຄື່ອງມືຂອງໄຟລ໌ຂໍ້ມູນ, ຫມາຍເຖິງ G1.

    6) ເມື່ອນໍາໃຊ້ການຕັ້ງຄ່າການໄດ້ຮັບຂະຫນາດກາງໃນເບື້ອງຕົ້ນ, ຄວນສັງເກດວ່າ: ຖ້າຄ່າ fluorescence ສູງເກີນຂອບເຂດຈໍາກັດເທິງຂອງເຄື່ອງມື, ມູນຄ່າການໄດ້ຮັບຄວນໄດ້ຮັບການຫຼຸດລົງຢ່າງເຫມາະສົມ;ຖ້າຄ່າ fluorescence ສູງຢູ່ໄກກວ່າຂອບເຂດຈໍາກັດເທິງຂອງເຄື່ອງມື, ມູນຄ່າການໄດ້ຮັບຄວນຈະເພີ່ມຂຶ້ນຢ່າງເຫມາະສົມ;ສຸດທ້າຍ, ມູນຄ່າທີ່ໄດ້ຮັບທີ່ເຫມາະສົມແມ່ນໄດ້ຮັບ, ຫມາຍເຖິງ G2.

     

    2.ກໍານົດຕົວກໍານົດການເຄື່ອງມື:

    ແຜ່ນສັ່ນ 10 ~ 15s ກ່ອນທີ່ຈະກວດພົບ;

    ຄວາມຍາວຄື້ນຄວາມຕື່ນເຕັ້ນ λEx=485nm;

    ຄວາມຍາວຄື້ນການປ່ອຍອາຍພິດ λEm=525nm;

    ກໍານົດມູນຄ່າເພີ່ມເປັນ G1 ຫຼື G2 ໄດ້ຮັບໃນຂັ້ນຕອນທີ 1 ;

    ອຸນຫະພູມ 37 ℃;

    ຖ້າຕົວອ່ານ microplate ຮອງຮັບ kinetic mode, ມັນແນະນໍາໃຫ້ໃຊ້ kinetic detection mode, ໂດຍມີໄລຍະຫ່າງ 1 ຫາ 1.5 ນາທີ, ແລະເວລາທັງຫມົດແມ່ນ 30 ນາທີ.

     

    3.ການກະກຽມຕົວຢ່າງ

    ປະລິມານຕົວຢ່າງທີ່ແນະນໍາແມ່ນ 80μL.ຖ້າຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບແມ່ນຫນ້ອຍກວ່າ 80μL, ໃຫ້ເຈືອຈາງເປັນ 80μL ດ້ວຍນ້ໍາທີ່ບໍ່ມີ DNase&RNase.

    ເມື່ອຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບມີສານທີ່ສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ການສ່ອງແສງຂອງ fluorophore (ເຊັ່ນ: ການແກ້ໄຂຊ້ໍາ, ສານ viscous ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສູງຫຼື surfactants), ຕົວຢ່າງຄວນໄດ້ຮັບການເຈືອຈາງດ້ວຍນ້ໍາທີ່ບໍ່ມີ DNase & RNase, ແຕ່ກະລຸນາສັງເກດວ່າການປະຕິບັດການເຈືອຈາງຈະມີຜົນກະທົບ. ຄວາມອ່ອນໄຫວ.ສໍາ​ລັບ​ຕົວ​ຢ່າງ​ທີ່​ຈະ​ໄດ້​ຮັບ​ການ​ທົດ​ສອບ​ທີ່​ປະ​ກອບ​ດ້ວຍ DNase ກິດ​ຈະ​ກໍາ inhibitors (ເຊັ່ນ​: ການ​ແກ້​ໄຂ​ຄວາມ​ເຂັ້ມ​ແຂງ ionic ສູງ​, pH<4 ຫຼື pH​>9 buffers​, ທາດ​ໂປຼ​ຕີນ​ຈາກ denaturants​, ແລະ​ອື່ນໆ​)​, ຜົນ​ການ​ວັດ​ແທກ​ແມ່ນ​ກິດ​ຈະ​ກໍາ​ຂອງ​ເອນ​ໄຊ​ໂດຍ​ລວມ​ຂອງ​ການ​ແກ້​ໄຂ​ຕົວ​ຢ່າງ​, ບໍ່​ແມ່ນ​. ກິດຈະກໍາສ່ວນບຸກຄົນຂອງ enzyme ໄດ້.

    ເຈືອຈາງ DNase I ມາດຕະຖານ (2U/μL) ດ້ວຍ Standard Dilution Buffer ດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້:

    ບໍ່.

    ຂະບວນການກະກຽມ

    ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ

    1

    2μL DNase I ມາດຕະຖານ + 198μL ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    2×10-2U/μL

    2

    2μL No. 1 ຕົວຢ່າງ + 198μL ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    2×10-4U/μL

     ເຈືອຈາງຕົວຢ່າງເລກ 2 ດ້ວຍນ້ໍາທີ່ບໍ່ມີ DNase & RNase ເປັນເວລາ 10 ເທື່ອ:

    3

    20μL No. 2 ຕົວຢ່າງ + 180μL DNase & RNase-free water

    2×10-5U/μL

    No. 3 ຕົວຢ່າງຖືກນໍາໃຊ້ເປັນການຄວບຄຸມໃນທາງບວກ;ນໍ້າທີ່ບໍ່ມີ DNase&RNase ຖືກນໍາໃຊ້ເປັນການຄວບຄຸມທາງລົບ.

    1. ປະລິມານແລະການທົດສອບ

    1) ຕື່ມການແກ້ໄຂບັນຫາການເຮັດວຽກຂອງ DNA probe 10μL ແລະການແກ້ໄຂ 10μL 10×Reaction ກັບແຜ່ນ 96 ດີ.ເລືອກ 4 ຂຸມທີ່ຈະເພີ່ມການຄວບຄຸມທາງລົບແລະການຄວບຄຸມທາງບວກຕາມລໍາດັບ, ແລະຂຸມອື່ນໆທີ່ຈະເພີ່ມຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບ.ມີ 2 ຂຸມສໍາລັບແຕ່ລະຕົວຢ່າງ, 80μL ສໍາລັບແຕ່ລະນ້ໍາ;

    2) ທັນທີທົດສອບແລະອ່ານຄ່າສັນຍານ fluorescence RFU0 ສໍາລັບ 0min.ຫຼັງຈາກຖືກວາງໄວ້ໃນຄວາມມືດຢູ່ທີ່ 37 ℃ສໍາລັບ 30 ນາທີ, ທົດສອບແລະອ່ານຄ່າສັນຍານ fluorescence RFU30 ສໍາລັບ 30min ອີກເທື່ອຫນຶ່ງ.ຖ້າ​ຫາກ​ວ່າ​ຮູບ​ແບບ​ການ​ເຄື່ອນ​ໄຫວ​ແມ່ນ​ໄດ້​ຮັບ​ຮອງ​ເອົາ​, ສັນ​ຍານ fluorescence ທັງ​ຫມົດ​ສໍາ​ລັບ​ການ 0 ~ 30min ສາ​ມາດ​ອ່ານ​ໄດ້​.

     

    ການ​ຕີ​ລາ​ຄາ​ຜົນ​ການ​ທົດ​ສອບ​

    ຖ້າ RFU30≥2×RFU0, ມັນຖືວ່າຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບຖືກປົນເປື້ອນໂດຍ DNase.

    ຫມາຍເຫດ: ຖ້າຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບມີການປົນເປື້ອນຢ່າງຮຸນແຮງຫຼືມີສານແຊກແຊງ, ມັນອາດຈະເກີດຂື້ນວ່າ RFU0 (ຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບ) > RFU0 (ການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບໃນທາງບວກ) ແລະ RFU30 (ຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບ) < 2 × RFU0 (ຕົວຢ່າງທີ່ຈະເປັນ. ທົດສອບ), ນໍາໄປສູ່ການຕັດສິນໃນທາງລົບທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງ.ໃນເວລານີ້, ຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບຈະຖືກເຈືອຈາງກ່ອນດ້ວຍນ້ໍາທີ່ບໍ່ມີ DNase & RNase, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນທົດສອບ.

     

    ການ​ກວດ​ສອບ​ປະ​ລິ​ມານ​

    ເມື່ອຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບຖືກປົນເປື້ອນແລະມັນຈໍາເປັນຕ້ອງຕັດສິນຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ DNase ໃນຕົວຢ່າງ, ມັນສາມາດຖືກກໍານົດໂດຍຜ່ານຂັ້ນຕອນຕໍ່ໄປນີ້:

    ເຈືອຈາງ DNase I ມາດຕະຖານ (2U/μL) ດ້ວຍ Standard Dilution Buffer ດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້:

    ບໍ່.

    ຂະບວນການກະກຽມ

    ເອກ

    1

    2μL DNase I ມາດຕະຖານ +198μL ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    2×10-2U/μL

    2

    2μL No. 1 ຕົວຢ່າງ +198μL ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    2×10-4U/μL

    3

    100μL No. 2 ຕົວຢ່າງ + 100μL ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    1×10-4U/μL

    4

    100μL No. 3 ຕົວຢ່າງ + 100μL ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    5×10-5U/μL

    5

    100μL No. 4 ຕົວຢ່າງ + 100μL ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    2.5×10-5U/μL

    6

    100μL No.5 ຕົວຢ່າງ + 100μL ມາດຕະຖານການເຈືອຈາງ Buffer

    1.25×10-5U/μL

    ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ເຈືອຈາງ No. 3 ~ No. 5 ຕົວຢ່າງດ້ວຍ DNase & RNase-free water ສໍາລັບ 10 ເທື່ອ:

    7

    20μLNo.3 ຕົວຢ່າງ + 180μL DNase & RNase ທີ່ບໍ່ມີນ້ໍາ

    1×10-5U/μL

    8

    20μLNo.4 ຕົວຢ່າງ + 180μL DNase & RNase ທີ່ບໍ່ມີນ້ໍາ

    5×10-6U/μL

    9

    20μLNo.5 ຕົວຢ່າງ + 180μL DNase & RNase ທີ່ບໍ່ມີນ້ໍາ

    2.5×10-6U/μL

    10

    20μLNo.6 ຕົວຢ່າງ + 180μL DNase & RNase ທີ່ບໍ່ມີນ້ໍາ

    1.25×10-6U/μL

    ສະບັບເລກທີ 7 ~ ເລກທີ 10 ຕົວຢ່າງຖືກນໍາໃຊ້ເປັນມາດຕະຖານ;ນ້ໍາທີ່ບໍ່ມີ DNase ແລະ RNase ເປັນຕົວຢ່າງ 0 ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ.

    ທົດສອບ 0-concentration sample, standard and contaminated sample together according to the detection steps to get RFU0 and RFU30.Calculate ∆RFU = RFU30-RFU0, ເອົາ ∆RFU (0 ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ) ແລະ ∆RFU (ມາດຕະຖານ) ເປັນ ordinate ແລະ DNase I ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ. ຂອງມາດຕະຖານເຊັ່ນ abscissa (0 ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນແມ່ນ 0), ປະຕິບັດ linear fitting, ແລະຄິດໄລ່ສົມຜົນ fitting y = ax + B, ແລະ coefficient correlation ຄວນຈະ ≥ 0.99.ເອົາ ∆RFU (ຕົວຢ່າງທີ່ປົນເປື້ອນ) ເຂົ້າໄປໃນສົມຜົນເປັນ y, ຄິດໄລ່ x, ແລະຄູນມັນດ້ວຍຕົວຢ່າງກ່ອນການເຈືອຈາງຫຼາຍເພື່ອໃຫ້ໄດ້ຄ່າຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນໂດຍປະມານຂອງຕົວຢ່າງທີ່ປົນເປື້ອນ.

    ໝາຍເຫດ: ເນື່ອງຈາກການເໜັງຕີງຂອງສັນຍານເຄື່ອງມື, ມັນອາດຈະເກີດຂຶ້ນໄດ້ວ່າ ∆RFU<0, ໃນເວລານີ້, ມັນຖືກຄິດໄລ່ເປັນ ∆RFU=0.

     

    ປະສິດທິພາບການຊອກຄົ້ນຫາ

    1. ຂີດຈຳກັດການກວດພົບ: DNase I: 1.25×10-6U/μL

    2.Precision: intra batch coefficient of variation ≤ 10%, inter batch coefficient of variation ≤ 15%

     

    ເອົາໃຈໃສ່

    1. ການປະຕິບັດການເພີ່ມຕົວຢ່າງຄວນຈະໄວເທົ່າທີ່ຈະໄວໄດ້.ເວລາດົນເກີນໄປຈະສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງການທົດລອງ.

    2. ຕົວກໍານົດການຂອງເຄື່ອງມືການຕິດສະຫຼາກ fluorescent enzyme ທີ່ແຕກຕ່າງກັນ.ກໍານົດຜົນປະໂຫຍດທີ່ເຫມາະສົມກ່ອນການທົດສອບຄັ້ງທໍາອິດ.

    3. ທາດປະຕິກອນທັງໝົດຈະຕ້ອງຖືກສັ່ນຢ່າງເຕັມທີ່ກ່ອນທີ່ຈະໃຊ້.ເມື່ອເພີ່ມຕົວຢ່າງ, ຕົວຢ່າງທີ່ເພີ່ມຈະຖືກເພີ່ມໃສ່ດ້ານລຸ່ມຂອງແຜ່ນປ້າຍ enzyme ໄດ້ດີເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການເພີ່ມພວກມັນໃສ່ສ່ວນເທິງຂອງຝາດີ.ເມື່ອເພີ່ມຕົວຢ່າງ, ຈົ່ງເອົາໃຈໃສ່ບໍ່ໃຫ້ກະແຈກກະຈາຍຫຼືສ້າງຟອງ.

    4. ມາດຕະຖານໃນຊຸດແມ່ນ DNase I, ແລະຫນ່ວຍງານການເຄື່ອນໄຫວຂອງມັນຖືກກໍານົດເປັນຫນ່ວຍງານຫນຶ່ງຖືກກໍານົດເປັນຈໍານວນເອນໄຊທີ່ຈະທໍາລາຍ 1 µg ຂອງ pBR322 DNA ຢ່າງສົມບູນໃນ 10 ນາທີທີ່ 37 ° C ໃນ DNase I Reaction Buffer[ 1].ໜ່ວຍ DNase I ໜຶ່ງໜ່ວຍເທົ່າກັບ 0.3 ໜ່ວຍ Kunitz[2].

    5. ເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການປົນເປື້ອນ DNase exogenous, DNase RNase ໄປສາມາດສີດໃສ່ພື້ນຜິວຂອງຕາຕະລາງທົດລອງ, ຖົງມືແລະພື້ນຜິວອື່ນໆ.ຫຼັງຈາກ 5 ນາທີ, ເຮັດຄວາມສະອາດພວກມັນດ້ວຍຜ້າເຊັດເຈ້ຍທີ່ສະອາດແລະຫຼັງຈາກນັ້ນດໍາເນີນການທົດລອງຕໍ່ໄປ.

     

     

    ຂຽນຂໍ້ຄວາມຂອງທ່ານທີ່ນີ້ແລະສົ່ງໃຫ້ພວກເຮົາ