ໂປຣ
ຜະລິດຕະພັນ
Rnase assay Kit (Fluorescence) HCP0035A ຮູບພາບທີ່ໂດດເດັ່ນ
  • ຊຸດທົດສອບ Rnase (Fluorescence) HCP0035A

ຊຸດທົດສອບ Rnase (Fluorescence)


ໝາຍເລກແມວ:HCP0035A

ການຫຸ້ມຫໍ່: 48T / 96T

ຊຸດກວດຫາ RNase ແມ່ນອີງໃສ່ການສຳຫຼວດ RNA ທີ່ມີປ້າຍກຳກັບ fluorophore.

ລາຍ​ລະ​ອຽດ​ຜະ​ລິດ​ຕະ​ພັນ

ຂໍ້ມູນຜະລິດຕະພັນ

ຊຸດກວດຫາ RNase ແມ່ນອີງໃສ່ການສຳຫຼວດ RNA ທີ່ມີປ້າຍກຳກັບ fluorophore.ເມື່ອຕົວຢ່າງບໍ່ມີກິດຈະກໍາ RNase, probe ມີຄວາມຫມັ້ນຄົງແລະບໍ່ຜະລິດສັນຍານ fluorescent;ໃນເວລາທີ່ຕົວຢ່າງປະກອບດ້ວຍກິດຈະກໍາ RNase, probe ໄດ້ຖືກຊຸດໂຊມ, ເຮັດໃຫ້ສັນຍານ fluorescence ປັບປຸງເທື່ອລະກ້າວ;ອັດຕາການເພີ່ມຂື້ນຂອງສັນຍານ fluorescence ແມ່ນກ່ຽວຂ້ອງໃນທາງບວກກັບຈໍານວນແລະກິດຈະກໍາຂອງ enzymes.ໃຊ້ເຄື່ອງອ່ານ microplate fluorescence ເພື່ອວັດແທກຄວາມຍາວຄື່ນຂອງ ex/em=535/575nm ເພື່ອກໍານົດວ່າຕົວຢ່າງຖືກປົນເປື້ອນໂດຍ RNase.


  • ທີ່ຜ່ານມາ:
  • ຕໍ່ໄປ:

  • ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ

    ຊຸດນີ້ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອກວດຫາການປົນເປື້ອນ RNase ໃນຕົວຢ່າງ.

     

    Cອົງປະກອບ

    ຊື່

    HCP0035A-01

    (192T)

    HCP0035A-02

    (48T)

    10× ການ​ແກ້​ໄຂ​ຕິ​ກິ​ຣິ​ຍາ​

    2.0 ມລ

    0.5 ມລ

    ການສືບສວນ RNA

    1 ທໍ່

    1 ທໍ່

    TE buffer

    2.0 ມລ

    0.5 ມລ

    ມາດຕະຖານ RNase A (10mg/mL)

    20μL

    10μL

    ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    12 ມລ

    6 ມລ

    ນ້ຳທີ່ບໍ່ມີ DNase ແລະ RNase

    25 ມລ

    25 ມລ

    DNase RNase ໄປ

    50ml

    50ml

     

    ການເກັບຮັກສາແລະຄວາມຫມັ້ນຄົງ

    1. ການຂົນສົ່ງໃນ -25 ~ - 15 ℃;

    2.ອົງປະກອບທີ່ແຕກຕ່າງກັນຂອງຊຸດໄດ້ຖືກເກັບຮັກສາໄວ້ແຍກຕ່າງຫາກຕາມອຸນຫະພູມ:

    ຊື່

    ອຸນ​ຫະ​ພູມ

    10× ການ​ແກ້​ໄຂ​ຕິ​ກິ​ຣິ​ຍາ​

    -25 ~ – 15 ℃​

    ການສືບສວນ RNA

    -25 ~ – 15 ℃​

    TE buffer

    -25 ~ – 15 ℃​

    ມາດຕະຖານ RNase A (10mg/mL)

    -25 ~ – 15 ℃​

    ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    -25 ~ – 15 ℃​

    ນ້ຳທີ່ບໍ່ມີ DNase ແລະ RNase

    -25 ~ 30 ℃​

    DNase RNase ໄປ

    2 ~ 30 ℃​

    3. ເກັບຮັກສາຊຸດທີ່ບໍ່ໄດ້ເປີດໄວ້ເປັນເວລາ 12 ເດືອນ.

    4.ເກັບຮັກສາຊຸດສໍາລັບ 6 ເດືອນຫຼັງຈາກເປີດ.ມັນ​ໄດ້​ຖືກ​ແນະ​ນໍາ​ໃຫ້ aliquot ການ​ແກ້​ໄຂ RNA probe ຕາມ​ຈໍາ​ນວນ​ການ​ນໍາ​ໃຊ້​ດຽວ​ເພື່ອ​ຫຼີກ​ເວັ້ນ​ການ​ແສງ​ສະ​ຫວ່າງ​ແລະ​ຊ​້​ໍ​າ freezing ແລະ thawing​.

     

    ອຸປະກອນທີ່ຕ້ອງການແລະເຄື່ອງບໍລິໂພກ

    1.ເຄື່ອງອ່ານຈຸນລະພາກ fluorescence (ລວມທັງ ex/em=535/575nm wavelength)

    2. DNase&RNase-free pipettes ແລະຄໍາແນະນໍາ

    3. ທໍ່ EP ທີ່ບໍ່ມີ DNase&RNase

    4. ແຜ່ນດີນ 96-ບໍ່ໂປ່ງໃສສີດຳທີ່ບໍ່ມີ DNase&RNase

    ການກະກຽມ Reagent

    1.ເອົາຊຸດອອກແລະສົມທຽບກັບອຸນຫະພູມຫ້ອງ (18 ~ 25 ℃), ສັ່ນແລະປະສົມອົງປະກອບເຊັ່ນ: ການແກ້ໄຂປະຕິກິລິຍາ 10 ×, TE buffer, ມາດຕະຖານ RNase A (10mg / mL), ມາດຕະຖານການເຈືອຈາງ Buffer, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນ centrifuge ທັນທີ.(centrifuge ຢູ່ 4000 ~ 7000rpm ສໍາລັບ 10 ວິນາທີ).

     2. Centrifuge the RNA probe at 4000~7000rpm for 60 seconds to collect it to the bottom of the tube , ລະມັດລະວັງເປີດຝາທໍ່, ແລະເພີ່ມ 40μL TE buffer ເພື່ອລະລາຍເປັນການແກ້ໄຂການເກັບຮັກສາ RNA probe, aliquot ການແກ້ໄຂການເກັບຮັກສາ RNA probe ຕາມ. ໃນປະລິມານການນໍາໃຊ້ຄັ້ງດຽວແລະເກັບຮັກສາໃຫ້ເຂົາເຈົ້າຢູ່ທີ່ -25 ~ -15 ° C ເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການແຊ່ແຂງແລະ thawing ຊ້ໍາ.ເອົາການແກ້ໄຂການເກັບຮັກສາ probe ໃນແຕ່ລະຄັ້ງທີ່ທ່ານທົດສອບ, ເຈືອຈາງມັນ 50 ເທື່ອດ້ວຍ TE buffer (ຕົວຢ່າງ, ເພີ່ມ 490μL TE buffer ເຂົ້າໄປໃນ 12μL RNA probe) ເປັນ RNA probe work Solution.ເກັບຮັກສາສ່ວນທີ່ເຫຼືອຂອງ RNA probe ການແກ້ໄຂການເຮັດວຽກຢູ່ທີ່ -25 ~ -15 ° C ເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການແສງສະຫວ່າງແລະການແຊ່ແຂງຊ້ໍາແລະ thawing.

     

    ຂັ້ນຕອນການກວດຫາ

    1. ຂັ້ນຕອນເພື່ອກໍານົດການເພີ່ມຂຶ້ນທີ່ເຫມາະສົມກ່ອນການທົດສອບຄັ້ງທໍາອິດ, ເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການຄວາມສ່ຽງຂອງການສູນເສຍຄວາມອ່ອນໄຫວຫຼື oversaturation ສັນຍານ.

    1​) ຕົວ​ກໍາ​ນົດ​ການ​ເຄື່ອງ​ມື​:

    ແຜ່ນສັ່ນ 10 ~ 15s ກ່ອນທີ່ຈະກວດພົບ;

    ຄວາມຍາວຄື້ນຄວາມຕື່ນເຕັ້ນ λEx=535nm;

    ຄວາມຍາວຄື້ນການປ່ອຍອາຍພິດ λEm=575nm;

    ໃຊ້ຟັງຊັນການເພີ່ມອັດຕະໂນມັດ;

    ອຸນຫະພູມ 37 ℃;

    ໂໝດຈຸດສິ້ນສຸດ.

    ຕັ້ງຄ່າການເພີ່ມຂະໜາດອັດຕະໂນມັດຖ້າເປັນໄປໄດ້, ຫຼືໃຊ້ການຕັ້ງຄ່າການເພີ່ມຂະໜາດກາງໃນເບື້ອງຕົ້ນ.

    ຫມາຍເຫດ: ວິທີການຕັ້ງຂອງເຄື່ອງມືທີ່ແຕກຕ່າງກັນແມ່ນບໍ່ສອດຄ່ອງ, ກະລຸນາປຶກສາຜູ້ສະຫນອງເຄື່ອງມືສໍາລັບລາຍລະອຽດ.

    2) ເລືອກ 2 ຂຸມໃນແຜ່ນ 96 ດີ, ເພີ່ມ 10μL RNA probe work solution ແລະການແກ້ໄຂ 10μL 10 × ແຕ່ລະນ້ໍາ;

    3) ຕື່ມ 80μL ຂອງນ້ໍາ DNase & RNase-free ເຂົ້າໄປໃນນ້ໍາຫນຶ່ງ, ແລະເພີ່ມ 79μL ຂອງ DNase & RNase-ບໍ່ມີນ້ໍາແລະ 1μL RNase A ມາດຕະຖານ (100mg / mL) ກັບນ້ໍາອື່ນໆ.

    4) ເອົາແຜ່ນໃສ່ບ່ອນມືດທີ່ອຸນຫະພູມ 37 ອົງສາ ແລະ ທົດສອບພາຍຫຼັງ 30 ນາທີ.

    5) ຖ້າຕັ້ງການຮັບເປັນອັດຕະໂນມັດ, ຄ່າ Gain ຈະຖືກສະແດງຢູ່ໃນແຖບຕົວກໍານົດການເຄື່ອງມືຂອງໄຟລ໌ຂໍ້ມູນ, ຫມາຍເຖິງ G1.

    6) ເມື່ອນໍາໃຊ້ການຕັ້ງຄ່າການໄດ້ຮັບຂະຫນາດກາງໃນເບື້ອງຕົ້ນ, ຄວນສັງເກດວ່າ: ຖ້າຄ່າ fluorescence ສູງເກີນຂອບເຂດຈໍາກັດເທິງຂອງເຄື່ອງມື, ມູນຄ່າການໄດ້ຮັບຄວນໄດ້ຮັບການຫຼຸດລົງຢ່າງເຫມາະສົມ;ຖ້າຄ່າ fluorescence ສູງຢູ່ໄກກວ່າຂອບເຂດຈໍາກັດເທິງຂອງເຄື່ອງມື, ມູນຄ່າການໄດ້ຮັບຄວນຈະເພີ່ມຂຶ້ນຢ່າງເຫມາະສົມ;ສຸດທ້າຍ, ມູນຄ່າທີ່ໄດ້ຮັບທີ່ເຫມາະສົມແມ່ນໄດ້ຮັບ, ຫມາຍເຖິງ G2.

    2. ສແລະຕົວກໍານົດການເຄື່ອງມື:

    ແຜ່ນສັ່ນ 10 ~ 15s ກ່ອນທີ່ຈະກວດພົບ;

    ຄວາມຍາວຄື້ນຄວາມຕື່ນເຕັ້ນ λEx=485nm;

    ຄວາມຍາວຄື້ນການປ່ອຍອາຍພິດ λEm=525nm;

    ກໍານົດມູນຄ່າເພີ່ມເປັນ G1 ຫຼື G2 ໄດ້ຮັບໃນຂັ້ນຕອນທີ 1;

    ອຸນຫະພູມ 37 ℃;

    ຖ້າຕົວອ່ານ microplate ຮອງຮັບ kinetic mode, ມັນແນະນໍາໃຫ້ໃຊ້ kinetic detection mode, ໂດຍມີໄລຍະຫ່າງ 1 ຫາ 1.5 ນາທີ, ແລະເວລາທັງຫມົດແມ່ນ 30 ນາທີ.

    3.ການກະກຽມຕົວຢ່າງ

    ປະລິມານຕົວຢ່າງທີ່ແນະນໍາແມ່ນ 80μL.ຖ້າຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບແມ່ນຫນ້ອຍກວ່າ 80μL, ໃຫ້ເຈືອຈາງເປັນ 80μL ດ້ວຍນ້ໍາທີ່ບໍ່ມີ DNase&RNase.

    ເມື່ອຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບມີສານທີ່ສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ການສ່ອງແສງຂອງ fluorophore (ເຊັ່ນ: ການແກ້ໄຂຊ້ໍາ, ສານ viscous ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສູງຫຼື surfactants), ຕົວຢ່າງຄວນໄດ້ຮັບການເຈືອຈາງດ້ວຍນ້ໍາທີ່ບໍ່ມີ DNase & RNase, ແຕ່ກະລຸນາສັງເກດວ່າການປະຕິບັດການເຈືອຈາງຈະມີຜົນກະທົບ. ຄວາມອ່ອນໄຫວ.ສໍາ​ລັບ​ຕົວ​ຢ່າງ​ທີ່​ຈະ​ທົດ​ສອບ​ທີ່​ປະ​ກອບ​ດ້ວຍ inhibitors ກິດ​ຈະ​ກໍາ RNase (ເຊັ່ນ​: ການ​ແກ້​ໄຂ​ຄວາມ​ເຂັ້ມ​ແຂງ ionic ສູງ​, pH<4 ຫຼື pH​>9 buffers​, ທາດ​ໂປຼ​ຕີນ​ຈາກ denaturants​, ແລະ​ອື່ນໆ​)​, ຜົນ​ການ​ວັດ​ແທກ​ແມ່ນ​ກິດ​ຈະ​ກໍາ​ຂອງ​ເອນ​ໄຊ​ໂດຍ​ລວມ​ຂອງ​ການ​ແກ້​ໄຂ​ຕົວ​ຢ່າງ​, ບໍ່​ແມ່ນ​. ກິດຈະກໍາສ່ວນບຸກຄົນຂອງ enzyme ໄດ້.

     

    ເຈືອຈາງ DNase I ມາດຕະຖານ (10mg/mL) ດ້ວຍ Standard Dilution Buffer ດັ່ງນີ້: 

    ບໍ່.

    ຂະ​ບວນ​ການ​ກະ​ກຽມ​

    ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ

    1

    2μL RNase A ມາດຕະຖານ + 198μL ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    0. 1 ມກ/ມລ

    2

    2μL No. 1 ຕົວຢ່າງ + 198μL ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    1 × 10-3 ມກ/ມລ

    3

    2μL No. 2 ຕົວຢ່າງ + 198μL ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    1×10-5mg/ml

    4

    2μL No. 3 ຕົວຢ່າງ + 198μLStandard Dilution Buffer

    1 × 10-7 ມກ/ມລ

    5

    100μL No. 4 ຕົວຢ່າງ + 100μL ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    5×10-8mg/ml

     ເຈືອຈາງຕົວຢ່າງເລກ 5 ດ້ວຍນ້ໍາທີ່ບໍ່ມີ DNase & RNase ເປັນເວລາ 10 ເທື່ອ:

    6

    20μL No. 5 ຕົວຢ່າງ + 180μL DNase & RNase-free water

    5×10-9mg/ml,

    5 pg/ml

    No. 6 ຕົວຢ່າງຖືກນໍາໃຊ້ເປັນການຄວບຄຸມໃນທາງບວກ;ນໍ້າທີ່ບໍ່ມີ DNase&RNase ຖືກນໍາໃຊ້ເປັນການຄວບຄຸມທາງລົບ.

    4.ປະລິມານແລະການທົດສອບ

    1) ເພີ່ມ10μL RNA probe ການແກ້ໄຂການເຮັດວຽກແລະການແກ້ໄຂ 10μL 10× ປະຕິກິລິຍາກັບແຜ່ນ 96-well.ເລືອກ 4 ຂຸມທີ່ຈະເພີ່ມການຄວບຄຸມທາງລົບແລະການຄວບຄຸມທາງບວກຕາມລໍາດັບ, ແລະຂຸມອື່ນໆທີ່ຈະເພີ່ມຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບ.ມີ 2 ຂຸມສໍາລັບແຕ່ລະຕົວຢ່າງ, 80μL ສໍາລັບແຕ່ລະນ້ໍາ;

    2) ທັນທີທົດສອບແລະອ່ານຄ່າສັນຍານ fluorescence RFU0 ສໍາລັບ 0min.ຫຼັງຈາກຖືກວາງໄວ້ໃນຄວາມມືດຢູ່ທີ່ 37 ℃ສໍາລັບ 30 ນາທີ, ທົດສອບແລະອ່ານຄ່າສັນຍານ fluorescence RFU30 ສໍາລັບ 30min ອີກເທື່ອຫນຶ່ງ.ຖ້າ​ຫາກ​ວ່າ​ຮູບ​ແບບ​ການ​ເຄື່ອນ​ໄຫວ​ແມ່ນ​ໄດ້​ຮັບ​ຮອງ​ເອົາ​, ສັນ​ຍານ fluorescence ທັງ​ຫມົດ​ສໍາ​ລັບ​ການ 0 ~ 30min ສາ​ມາດ​ອ່ານ​ໄດ້​.

     

    ການ​ຕີ​ລາ​ຄາ​ຜົນ​ການ​ທົດ​ສອບ​

    ຖ້າ RFU30≥2×RFU0, ມັນຖືວ່າຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບຖືກປົນເປື້ອນໂດຍ RNase.

    ຫມາຍເຫດ: ຖ້າຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບມີການປົນເປື້ອນຢ່າງຮຸນແຮງຫຼືມີສານແຊກແຊງ, ມັນອາດຈະເກີດຂື້ນວ່າ RFU0 (ຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບ) > RFU0 (ການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບໃນທາງບວກ) ແລະ RFU30 (ຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບ) < 2 × RFU0 (ຕົວຢ່າງທີ່ຈະເປັນ. ທົດສອບ), ນໍາໄປສູ່ການຕັດສິນໃນທາງລົບທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງ.ໃນເວລານີ້, ຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບຈະຖືກເຈືອຈາງກ່ອນດ້ວຍນ້ໍາທີ່ບໍ່ມີ DNase & RNase, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນທົດສອບ.

     

    ການ​ກວດ​ສອບ​ປະ​ລິ​ມານ​

    ເມື່ອຕົວຢ່າງທີ່ຈະທົດສອບຖືກປົນເປື້ອນແລະມັນຈໍາເປັນຕ້ອງຕັດສິນຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ RNase ໃນຕົວຢ່າງ, ມັນສາມາດຖືກກໍານົດໂດຍຜ່ານຂັ້ນຕອນຕໍ່ໄປນີ້:

     

    ເຈືອຈາງ RNase A ມາດຕະຖານ (10mg/mL) ດ້ວຍ Standard Dilution Buffer ດັ່ງນີ້:

    ບໍ່.

    ຂະບວນການກະກຽມ

    ເອກ

    1

    2μL RNase A ມາດຕະຖານ +198μL ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    0. 1 ມກ/ມລ

    2

    2μL No. 1 ຕົວຢ່າງ + 198μL ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    1×10-3mg/ml

    3

    2μL No. 2 ຕົວຢ່າງ + 198μL ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    1×10-5mg/ml

    4

    2μL No. 3 ຕົວຢ່າງ + 198μL ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    1×10-7mg/ml

    5

    100μL No.4 ຕົວຢ່າງ+100μL ມາດຕະຖານການເຈືອຈາງ Buffer

    5×10-8mg/ml

    6

    100μL No.5 ຕົວຢ່າງ + 100μL ມາດຕະຖານການເຈືອຈາງ Buffer

    2.5×10-8mg/ml

    7

    100μL No. 6 ຕົວຢ່າງ + 100μL ມາດຕະຖານ Dilution Buffer

    1.25×10-8mg/ml

    8

    100μL No. 7 ຕົວຢ່າງ + 100μL ມາດຕະຖານການເຈືອຈາງ Buffer

    6.25×10-9mg/ml

    9

    100μL No. 8 ຕົວຢ່າງ + 100μL ມາດຕະຖານການເຈືອຈາງ Buffer

    3. 125×10-9mg/ml

    ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ເຈືອຈາງ No. 6 ~ No. 9 ຕົວຢ່າງດ້ວຍ DNase & RNase-free water ສໍາລັບ 10 ເທື່ອ:

    10

    20μLNo.6 ຕົວຢ່າງ + 180μL DNase & RNase ທີ່ບໍ່ມີນ້ໍາ

    2.5×10-9mg/ml

    11

    20μL No.7 ຕົວຢ່າງ+180μL DNase&RNase-free water

    1.25×10-9 ມກ/ມລ

    12

    20μL No.8 ຕົວຢ່າງ+180μL DNase&RNase-free water

    6.25×10- 10 ມກ/ມລ

    13

    20μL No.9 ຕົວຢ່າງ+180μL DNase&RNase-free water

    3. 13×10- 10 ມກ/ມລ

     

    No. 10 ~ No. 13 ຕົວຢ່າງຖືກນໍາໃຊ້ເປັນມາດຕະຖານ;ນ້ໍາທີ່ບໍ່ມີ DNase ແລະ RNase ເປັນຕົວຢ່າງ 0 ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ.

    ທົດສອບ 0- ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງຕົວຢ່າງ, ມາດຕະຖານແລະຕົວຢ່າງທີ່ປົນເປື້ອນຮ່ວມກັນຕາມຂັ້ນຕອນການກວດພົບເພື່ອໃຫ້ໄດ້ RFU0 ແລະ RFU30.

     

    ຄິດໄລ່ ∆RFU = RFU30-RFU0, ເອົາ ∆RFU (0 ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ) ແລະ ∆RFU (ມາດຕະຖານ) ເປັນ ordinate ແລະ RNase ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງມາດຕະຖານເປັນ abscissa (0 ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນແມ່ນ 0), ປະຕິບັດ linear fitting, ແລະຄິດໄລ່ສົມຜົນ fitting y. = ax + B, ແລະຄ່າສໍາປະສິດ correlation r ຄວນເປັນ ≥ 0.99.ເອົາ ∆RFU (ຕົວຢ່າງທີ່ປົນເປື້ອນ) ເຂົ້າໄປໃນສົມຜົນເປັນ y, ຄິດໄລ່ x, ແລະຄູນມັນດ້ວຍຕົວຢ່າງກ່ອນການເຈືອຈາງຫຼາຍເພື່ອໃຫ້ໄດ້ຄ່າຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນໂດຍປະມານຂອງຕົວຢ່າງທີ່ປົນເປື້ອນ.

    ໝາຍເຫດ: ເນື່ອງຈາກການເໜັງຕີງຂອງສັນຍານເຄື່ອງມື, ມັນອາດຈະເກີດຂຶ້ນໄດ້ວ່າ ∆RFU<0, ໃນເວລານີ້, ມັນຖືກຄິດໄລ່ເປັນ ∆RFU=0.

     

    ປະສິດທິພາບການຊອກຄົ້ນຫາ

    1. ຂີດຈຳກັດການກວດພົບ: RNase A: 0.313pg/mL, ~ 1.56×10-9U/μL

    2.ຄວາມແມ່ນຍໍາ: ຄ່າສໍາປະສິດພາຍໃນ batch ຂອງການປ່ຽນແປງ ≤ 10%, ຄ່າສໍາປະສິດລະຫວ່າງ batch ຂອງການປ່ຽນແປງ ≤ 15%

     

    ເອົາໃຈໃສ່

    1. ການປະຕິບັດການເພີ່ມຕົວຢ່າງຄວນຈະໄວເທົ່າທີ່ຈະໄວໄດ້.ເວລາດົນເກີນໄປຈະສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງການທົດລອງ.

    2. ຕົວກໍານົດການຂອງເຄື່ອງມືການຕິດສະຫຼາກ fluorescent enzyme ທີ່ແຕກຕ່າງກັນ.ກໍານົດຜົນປະໂຫຍດທີ່ເຫມາະສົມກ່ອນການທົດສອບຄັ້ງທໍາອິດ.

    3. ທາດປະຕິກອນທັງໝົດຈະຕ້ອງຖືກສັ່ນຢ່າງເຕັມທີ່ກ່ອນທີ່ຈະໃຊ້.ເມື່ອເພີ່ມຕົວຢ່າງ, ຕົວຢ່າງທີ່ເພີ່ມຈະຖືກເພີ່ມໃສ່ດ້ານລຸ່ມຂອງແຜ່ນປ້າຍ enzyme ໄດ້ດີເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການເພີ່ມພວກມັນໃສ່ສ່ວນເທິງຂອງຝາດີ.ເມື່ອເພີ່ມຕົວຢ່າງ, ຈົ່ງເອົາໃຈໃສ່ບໍ່ໃຫ້ກະແຈກກະຈາຍຫຼືສ້າງຟອງ.

    4. ມາດຕະຖານໃນຊຸດແມ່ນ RNase A, ແລະຫນ່ວຍງານການເຄື່ອນໄຫວຂອງມັນຖືກກໍານົດເປັນຫນຶ່ງຫນ່ວຍຂອງເອນໄຊເຮັດໃຫ້ການດູດຊຶມເພີ່ມຂຶ້ນ 1.0 ທີ່ 260 nm ເມື່ອ RNA ຂອງເຊື້ອລາຖືກ hydrolyzed ທີ່ 37 ° C ແລະ pH 5.0[1].ຫ້າສິບຫນ່ວຍແມ່ນປະມານເທົ່າກັບ 1 ຫນ່ວຍ Kunitz[2].

    5.ເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການປົນເປື້ອນ RNase exogenous, DNase RNase ໄປສາມາດສີດໃສ່ພື້ນຜິວຂອງຕາຕະລາງທົດລອງ, ຖົງມືແລະພື້ນຜິວອື່ນໆ.ຫຼັງຈາກ 5 ນາທີ, ເຮັດຄວາມສະອາດພວກມັນດ້ວຍຜ້າເຊັດເຈ້ຍທີ່ສະອາດແລະຫຼັງຈາກນັ້ນດໍາເນີນການທົດລອງຕໍ່ໄປ.

     

     

     

    ຜະ​ລິດ​ຕະ​ພັນ​ທີ່​ກ່ຽວ​ຂ້ອງ

    ຂຽນຂໍ້ຄວາມຂອງທ່ານທີ່ນີ້ແລະສົ່ງໃຫ້ພວກເຮົາ