Robustart Taq DNA Polymerase

Robustt Taq DNA Polymerase ແມ່ນ DNA polymerase ເລີ່ມຕົ້ນຮ້ອນ.ຜະລິດຕະພັນນີ້ບໍ່ພຽງແຕ່ສາມາດຍັບຍັ້ງໄດ້ດີກວ່າປະຕິກິລິຢາທີ່ບໍ່ສະເພາະທີ່ເກີດຈາກການ annealing ທີ່ບໍ່ສະເພາະຂອງ primers ຫຼື primer ລວບລວມໃນຂະບວນການກະກຽມແລະຂະຫຍາຍລະບົບ PCR.ດັ່ງນັ້ນ, ມັນມີຄວາມສະເພາະທີ່ດີເລີດແລະມີປະສິດທິພາບຫຼາຍສໍາລັບການຂະຫຍາຍຂອງແມ່ແບບທີ່ມີຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຕ່ໍາ, ແລະມັນເຫມາະສົມກັບຕິກິຣິຍາຂະຫຍາຍ PCR multiplexed.ຍິ່ງໄປກວ່ານັ້ນ, ຜະລິດຕະພັນນີ້ມີການນໍາໃຊ້ທີ່ດີຫຼາຍ, ແລະຜົນໄດ້ຮັບການຂະຫຍາຍທີ່ຫມັ້ນຄົງສາມາດໄດ້ຮັບໃນປະເພດຕ່າງໆຂອງປະຕິກິລິຍາ PCR.

ອົງປະກອບ

1.5 U/μL Robustart Taq DNA polymerase

2.10 × PCR Buffer II (Mg²+ ຟຣີ) (ເລືອກໄດ້)

3.25 ມມ MgCl₂(ທາງເລືອກ)

* 10 × PCR Buffer II (Mg²+ ຟຣີ) ບໍ່ມີ dNTP ແລະ Mg²+, ກະລຸນາເພີ່ມ dNTPs ແລະ MgCl₂ໃນເວລາທີ່ການກະກຽມລະບົບຕິກິຣິຍາ.

ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກທີ່ແນະນໍາ

1.ການຂະຫຍາຍໄວ.

2.ການຂະຫຍາຍຫຼາຍ.

3.ການຂະຫຍາຍໂດຍກົງຂອງເລືອດ, swabs, ແລະຕົວຢ່າງອື່ນໆ.

4.ການກວດຫາພະຍາດທາງເດີນຫາຍໃຈ.

ເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາ

-20°C ສໍາລັບການເກັບຮັກສາໃນໄລຍະຍາວ, ຄວນປະສົມໃຫ້ດີກ່ອນທີ່ຈະນໍາໃຊ້, ຫຼີກເວັ້ນການ freeze ເລື້ອຍໆ.

* ຖ້າຝົນເກີດຂຶ້ນຫຼັງຈາກຕູ້ເຢັນ, ມັນເປັນປົກກະຕິ;ມັນໄດ້ຖືກແນະນໍາໃຫ້ສົມທຽບກັບອຸນຫະພູມຫ້ອງກ່ອນທີ່ຈະປະສົມແລະນໍາໃຊ້.

ນິຍາມຫົວໜ່ວຍ

ຫນ່ວຍງານທີ່ຫ້າວຫັນ (U) ຫນຶ່ງແມ່ນຖືກກໍານົດເປັນຈໍານວນເອນໄຊທີ່ລວມເອົາ 10 nmol ຂອງ deoxyribonucleotide ເຂົ້າໄປໃນວັດສະດຸທີ່ບໍ່ລະລາຍອາຊິດທີ່ 74 ° C ສໍາລັບ 30 ນາທີໂດຍໃຊ້ DNA ເຊື້ອອະສຸຈິຂອງປາແຊມມອນທີ່ເປີດໃຊ້ເປັນແມ່ແບບ / primer.

ການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບ

1.ຄວາມບໍລິສຸດ electrophoretic SDS-PAGE ສູງກວ່າ 98%.

2.ຄວາມອ່ອນໄຫວຂອງການຂະຫຍາຍ, ການຄວບຄຸມ batch-to-batch, ຄວາມຫມັ້ນຄົງ.

3.ບໍ່ມີກິດຈະກໍານິວເຄລຍ exogenous, ບໍ່ມີ endonuclease exogenous ຫຼື exonuclease ການປົນເປື້ອນ

ຄໍາແນະນໍາ

ການຕັ້ງຄ່າປະຕິກິລິຍາ

ໝາຍເຫດ:

1) ກ.ບັຟເຟີບໍ່ມີ dNTP ແລະ Mg²+, ກະລຸນາເພີ່ມ dNTPs ແລະ MgCl₂ໃນເວລາທີ່ການກະກຽມລະບົບຕິກິຣິຍາ.

2) ຂ.ຖ້າໃຊ້ສໍາລັບ qPCR/qRT-PCR, ຄວນເພີ່ມ fluorescent probes ໃສ່ລະບົບຕິກິຣິຍາ.ປົກກະຕິແລ້ວ, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ primer ສຸດທ້າຍຂອງ 0.2 μMຈະໃຫ້ຜົນໄດ້ຮັບທີ່ດີ;ຖ້າການປະຕິບັດປະຕິກິລິຍາບໍ່ດີ, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ primer ສາມາດປັບໄດ້ໃນລະດັບ 0.2-1 μM.ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ probe ປົກກະຕິແລ້ວແມ່ນ optimized ຢູ່ໃນລະດັບຂອງ 0.1-0.3 μM.ການທົດລອງ gradient ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສາມາດປະຕິບັດເພື່ອຊອກຫາການປະສົມປະສານທີ່ດີທີ່ສຸດຂອງ primer ແລະ probe.

ອະນຸສັນຍາການຂີ່ລົດຖີບຄວາມຮ້ອນ

ບັນທຶກ

1.ອັດ​ຕາ​ການ​ຂະ​ຫຍາຍ​ຕົວ​ຂອງ DNA polymerase ໄວ​ບໍ່​ຄວນ​ຈະ​ຫນ້ອຍ​ກ​່​ວາ 1 kb/10 s​.ອັດຕາການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງອຸນຫະພູມແລະການຫຼຸດລົງ, ຮູບແບບການຄວບຄຸມອຸນຫະພູມແລະປະສິດທິພາບການດໍາເນີນການຄວາມຮ້ອນຂອງອຸປະກອນ PCR ທີ່ແຕກຕ່າງກັນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ, ດັ່ງນັ້ນ, ມັນແນະນໍາໃຫ້ປັບປຸງເງື່ອນໄຂຕິກິຣິຍາທີ່ດີທີ່ສຸດສໍາລັບເຄື່ອງມື PCR ໄວສະເພາະ.

2.ລະບົບສາມາດປັບຕົວໄດ້ສູງ, ມີຄວາມສະເພາະແລະຄວາມອ່ອນໄຫວທີ່ສູງຂຶ້ນ.

3.ເຫມາະສໍາລັບການນໍາໃຊ້ເປັນ reagents ກວດຫາ PCR ຄວາມອ່ອນໄຫວສູງ, ແລະສາມາດໄດ້ຮັບການນໍາໃຊ້ໃນຕິກິຣິຍາການຂະຫຍາຍ PCR multiplex.

4.5′→3′ ກິດຈະກໍາໂພລີເມີເລດ, 5′→3′ ກິດຈະກໍາ exonuclease;ບໍ່ມີ 3′→5′ ກິດຈະກໍາ exonuclease;ບໍ່ມີຟັງຊັນການອ່ານ.

5.ເຫມາະສໍາລັບການທົດສອບຄຸນນະພາບແລະປະລິມານຂອງ PCR ແລະ RT-PCR.

6.3′ ສິ້ນສຸດຂອງຜະລິດຕະພັນ PCR ແມ່ນ A, ເຊິ່ງສາມາດໄດ້ຮັບການ cloned ໂດຍກົງເຂົ້າໄປໃນ vector T.

7.ວິທີການສາມຂັ້ນຕອນແມ່ນແນະນໍາສໍາລັບ primers ທີ່ມີອຸນຫະພູມຕ່ໍາ annealing ຫຼືສໍາລັບການຂະຫຍາຍຂອງ fragments ຍາວກວ່າ 200 bp.