ໂປຣ
ຜະລິດຕະພັນ
ໄວ Ampli RT-qPCR Premix plus-UNG HCB5144E ຮູບພາບທີ່ໂດດເດັ່ນ
  • ໄວ Ampli RT-qPCR Premix plus-UNG HCB5144E
  • ໄວ Ampli RT-qPCR Premix plus-UNG HCB5144E

ໄວ Ampli RT-qPCR Premix plus-UNG


ໝາຍເລກແມວ: HCB5144E

ຊຸດ: 100RXN/1000RXN/10000RXN

ເອນໄຊເລີ່ມຮ້ອນທີ່ແກ້ໄຂດ້ວຍພູມຕ້ານທານ, 95 ອົງສາເຊ, ເລີ່ມຕົ້ນຮ້ອນ 1-5 ນາທີ

Multiplexed multi-channel qPCR ກວດພົບເປົ້າຫມາຍທີ່ແຕກຕ່າງກັນ

ການຂະຫຍາຍຄວາມອ່ອນໄຫວສູງຂອງແມ່ແບບ RNA ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຕໍ່າ

ການຂະຫຍາຍໄວ

ລາຍ​ລະ​ອຽດ​ຜະ​ລິດ​ຕະ​ພັນ

ລາຍລະອຽດຜະລິດຕະພັນ

ໝາຍເລກແມວ: HCB5144E

Fast Ampli RT-qPCR Premix plus-UNG ຖືກພັດທະນາໂດຍສະເພາະສໍາລັບຂະບວນການ lyophilization, ນໍາໃຊ້ສໍາລັບການວັດແທກປະລິມານ fluorescence (TaqMan probe) ການກວດຫາການຂະຫຍາຍ RNA ທີ່ປະກອບດ້ວຍ neocript reverse transcriptase ແລະການຂະຫຍາຍຢ່າງໄວວາ DNA Polymerase ທີ່ໄດ້ຮັບໂດຍການດັດແປງພັນທຸກໍາແລະການກວດສອບທີ່ສາມາດສໍາເລັດພາຍໃນ PCR amplification. -40 ນາທີ.ທາດ reagent ນີ້ preforms ສູງ inhibitor- ຄວາມທົນທານ, ເຊິ່ງມີ transcription ສູງແລະປະສິດທິພາບການຂະຫຍາຍ PCR, ທີ່ເຫມາະສົມສໍາລັບການຂະຫຍາຍຄວາມອ່ອນໄຫວສູງຂອງຕົວຢ່າງ RNA ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຕ່ໍາ.ເສັ້ນໂຄ້ງມາດຕະຖານທີ່ດີສາມາດໄດ້ຮັບພາຍໃນຂອບເຂດປະລິມານກວ້າງ, ແລະການກໍານົດປະລິມານສາມາດປະຕິບັດໄດ້ຢ່າງຖືກຕ້ອງ.ທາດປະຕິສັງຂອນນີ້ໃຊ້ເອນໄຊປະສົມຂອງເອນໄຊການຂະຫຍາຍການຕ້ານການຍັບຍັ້ງ ແລະເອນໄຊ UNG, ເຊັ່ນດຽວກັນກັບລະບົບ buffer ທີ່ດີທີ່ສຸດທີ່ມີ dUTP.ມັນບໍ່ພຽງແຕ່ສາມາດບັນລຸການຂະຫຍາຍທີ່ດີຂອງ gene ເປົ້າຫມາຍໃນຕົວຢ່າງທີ່ມີສານ inhibitors, ແຕ່ຍັງປ້ອງກັນການຂະຫຍາຍທາງບວກທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງທີ່ເກີດຈາກມົນລະພິດ PCR ແລະ aerosol.ທາດປະສົມນີ້ແມ່ນເຂົ້າກັນໄດ້ກັບອຸປະກອນ PCR ປະລິມານ fluorescent ສ່ວນໃຫຍ່, ເຊັ່ນ: Applied Biosystems, Eppendorf, Bio-Rad, Roche ແລະອື່ນໆ.ທາດປະສົມນີ້ສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບການ lyophilization ເພື່ອໃຫ້ໄດ້ຮັບຮູບແບບ lyophilized ທີ່ດີແລະຄວາມຫມັ້ນຄົງຂອງຜະລິດຕະພັນ.


  • ທີ່ຜ່ານມາ:
  • ຕໍ່ໄປ:

  • ອົງປະກອບຂອງ Reagent

    1. 12.5×FastAmpli Part Taq/UNG Mix (ກັບ dNTPs) (DG)

    2. 50× FastAmpli Part RTase (DG)

    3. 5 × FastAmpliRT Buffer (DG)

    4. 4 × lyoprotectant (ທາງເລືອກ) (DG)

     

    ເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາ

    ສາ​ມາດ​ເກັບ​ຮັກ​ສາ​ໄວ້​ທີ່ -20 ℃​ໃນ​ໄລ​ຍະ​ຍາວ​, ຢູ່​ທີ່ 4℃​ສໍາ​ລັບ​ການ​ສູງ​ເຖິງ 3 ເດືອນ​.ປົນກັນກ່ອນທີ່ຈະນໍາໃຊ້ແລະຫຼີກເວັ້ນfreeze-thaw ເລື້ອຍໆ.

     

    Cycling Protocol

     

    ຂັ້ນຕອນ

     

    ອຸນຫະພູມ

    PCR ປົກກະຕິ ຂັ້ນຕອນ

    PCR ໄວຂັ້ນຕອນ

     

    ຮອບວຽນ

    ໄລຍະເວລາ

    ໄລຍະເວລາ

    ປີ້ນກັບກັນການຖອດຂໍ້ຄວາມ

    50 ℃

    15 ນາທີ

    5 ນທ

    ຖື

    ໂພລີເມີເຣສການເປີດໃຊ້ງານ

    95℃

    1-5 ນາທີ

    1-2 ນາທີ

    ຖື

    Denature

    95℃

    10-20 ວິນາທີ

    1-3 ວິ

    40-50

    ການບີບອັດ/ຂະຫຍາຍ

    56-64℃

    20-60 ວ

    3-20 ວິ

     

    RT-qPCR Liquid Reactລະບົບ ion

    ອົງປະກອບ

    25µL ປະລິມານ

    50µL ປະລິມານ

    ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ

    5× FastAmpli RT Buffer

    5µL

    10µL

    12.5× FastAmpli Part Taq/UNG Mix (ກັບ dNTPs)

    2µL

    4µL

    50× FastAmpli Part RTase

    0.5µL

    1µL

    4×lyoprotectant

    6.25µL

    12.5µL

    25× Primer-Probe Mix

    1µL

    2µL

    ແມ່ແບບ RNA

     

     

     

    ddH2O

    ເຖິງ 25µL

    ເຖິງ 50µL

    1. ລະບົບນີ້ແມ່ນລະບົບ lyophilization;ເມື່ອລູກຄ້າໃຊ້ລະບົບນີ້ໂດຍບໍ່ມີຄວາມຕ້ອງການ lyophilization, 4 × lyoprotectant ສາມາດເລືອກໄດ້;ຖ້າມີຜະລິດຕະພັນ lyophilized ທີ່ຕ້ອງການ, ໃນລະຫວ່າງການກວດສອບປະສິດທິພາບຜະລິດຕະພັນຂອງທາດແຫຼວ, ມັນຕ້ອງເພີ່ມ 4 × lyoprotectant ເພື່ອຮັບປະກັນຄວາມສອດຄ່ອງຂອງອົງປະກອບຂອງລະບົບ lyophilized ແລະຜົນກະທົບ.

    2. ເມື່ອໃຊ້ຂັ້ນຕອນ PCR ປົກກະຕິ, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນສຸດທ້າຍຂອງ primer ແມ່ນປົກກະຕິແລ້ວ 0.2μM.ສໍາລັບຜົນໄດ້ຮັບທີ່ດີກວ່າ, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ primer ສາມາດຖືກປັບປຸງໃຫ້ເຫມາະສົມພາຍໃນຂອບເຂດຂອງ 0.2- 1.0μM.ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ probe ສາມາດຖືກປັບປຸງໃຫ້ເຫມາະສົມພາຍໃນຂອບເຂດຂອງ 0.1-0.3μM.ການທົດລອງ gradient ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສາມາດປະຕິບັດເພື່ອຊອກຫາການປະສົມປະສານທີ່ດີທີ່ສຸດຂອງ primers ແລະ probes.

    3. ເມື່ອນໍາໃຊ້ວິທີການຂະຫຍາຍ PCR ໄວ, ຜົນໄດ້ຮັບທີ່ດີກວ່າສາມາດບັນລຸໄດ້ໂດຍການເພີ່ມຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ primer / probe, ເຊັ່ນດຽວກັນກັບການປັບອັດຕາສ່ວນຂອງ primer ແລະ probe.

    4. ປະເພດຕ່າງໆຂອງແມ່ແບບມີຈໍານວນສໍາເນົາທີ່ແຕກຕ່າງກັນຂອງ gene ເປົ້າຫມາຍ.ການເຈືອຈາງ gradient ສາມາດເຮັດໄດ້ເພື່ອເລືອກປະລິມານການເພີ່ມແມ່ແບບທີ່ເຫມາະສົມ, ຖ້າຈໍາເປັນ.

     

    ການກະກຽມລະບົບ Lyophilization

    ອົງປະກອບ

    ປະຕິກິລິຍາ 25µL ລະບົບ

    5× FastAmpli RT Buffer

    5µL

    12.5×FastAmpli Part Taq/UNG Mix (ມີ dNTPs) (DG)

    2µL

    50× FastAmpli Part RTase (DG)

    0.5µL

    4×Lyoprotectant

    6.25µL

    25× Primer-Probe Mix

    1µL

    ddH2O

    ເຖິງ 18-20µL

    * ຖ້າລະບົບອື່ນໆສໍາລັບ lyophilization ແມ່ນຈໍາເປັນ, ກະລຸນາປຶກສາຫາລືແຍກຕ່າງຫາກ.

     

    Lyophilization Process

    ຂັ້ນຕອນ

    ອຸນຫະພູມ.

    ເວລາ

    ສະພາບ

    ຄວາມກົດດັນ

     ໜາວ

    4 ℃

    30 ນທ

    ຖື

     1 atm

    -50 ℃

    60 ນທ

    ຄວາມເຢັນ

    -50 ℃

    180 ນທ

    ຖື

     ການອົບແຫ້ງຂັ້ນຕົ້ນ

    -30℃

    60 ນທ

    ການໃຫ້ຄວາມຮ້ອນ

     ສູນຍາກາດສູງສຸດ

    -30℃

    720 ນທ

    ຖື

    ການອົບແຫ້ງຂັ້ນສອງ

    25℃

    60 ນທ

    ການໃຫ້ຄວາມຮ້ອນ

     ສູນຍາກາດສູງສຸດ

    25℃

    300 ນທ

    ຖື

    1. ຂະບວນການ lyophilization ນີ້ແມ່ນຂະບວນການແຊ່ແຂງຢູ່ໃນບ່ອນສໍາລັບລະບົບປະຕິກິລິຍາ 25µL;ຖ້າ​ຫາກ​ວ່າ​ການ​ເຮັດ​ໃຫ້​ແຫ້ງ beads freeze ຫຼື​ຂະ​ບວນ​ການ​ເຮັດ​ໃຫ້​ແຫ້ງ​ໃນ​ສະ​ຖານ​ທີ່​ອື່ນໆ​ແມ່ນ​ຕ້ອງ​ການ​, ກະ​ລຸ​ນາ​ສອບ​ຖາມ​ແຍກ​ຕ່າງ​ຫາກ​.

    2. ຂະບວນການ lyophilization ຂ້າງເທິງນີ້ແມ່ນສໍາລັບການອ້າງອີງເທົ່ານັ້ນ.ປະເພດຜະລິດຕະພັນທີ່ແຕກຕ່າງກັນແລະເຄື່ອງອົບແຫ້ງທີ່ແຕກຕ່າງກັນມີຕົວກໍານົດການທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ດັ່ງນັ້ນການປັບຕົວສາມາດເຮັດໄດ້ຕາມເງື່ອນໄຂຕົວຈິງໃນລະຫວ່າງການໃຊ້.

    3. ຂະບວນການ lyophilization ທີ່ແຕກຕ່າງກັນອາດຈະເຫມາະສົມສໍາລັບຂະຫນາດ batch ຜະລິດຕະພັນ lyophilized ທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ດັ່ງນັ້ນການກວດສອບຄວາມຖືກຕ້ອງພຽງພໍຕ້ອງໄດ້ຮັບການປະຕິບັດໃນເວລາທີ່ນໍາໃຊ້ສໍາລັບການຜະລິດຂະຫນາດໃຫຍ່.

     

    ຄໍາແນະນໍາສໍາລັບການນໍາໃຊ້ lyophilized ຝຸ່ນ

    1. ເອົາຜົງ lyophilized centrifuge ສັ້ນໆ;

    2. ເພີ່ມແມ່ແບບອາຊິດນິວຄລີອິກໃສ່ຜົງ lyophilized ແລະຕື່ມນ້ໍາເຖິງ 25µL;

    3. ປົນກັນໂດຍການ centrifugation ແລະດໍາເນີນການກ່ຽວກັບເຄື່ອງ.

     

    ການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບ

    1. ການທົດສອບການເຮັດວຽກ: ຄວາມອ່ອນໄຫວ, ສະເພາະ, ການສືບພັນຂອງ RT-qPCR.

    2. ບໍ່ມີກິດຈະກໍານິວເຄລຍ exogenous, ບໍ່ມີການປົນເປື້ອນ endo/exonuclease.

     

    ຂໍ້ມູນດ້ານວິຊາການ:

    1. ອັດ​ຕາ​ການ​ຂະ​ຫຍາຍ​ຕົວ​ຂອງ DNA polymerase ຢ່າງ​ວ່ອງ​ໄວ​ແມ່ນ​ບໍ່​ຫນ້ອຍ​ກ​່​ວາ 1kb/10s​.ເຄື່ອງມື PCR ທີ່ແຕກຕ່າງກັນມີຄວາມໄວຄວາມຮ້ອນແລະຄວາມເຢັນທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ຮູບແບບການຄວບຄຸມອຸນຫະພູມແລະການນໍາຄວາມຮ້ອນ, ດັ່ງນັ້ນການເພີ່ມປະສິດທິພາບຂອງຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ primer / probe ຂອງທ່ານແລະວິທີການແລ່ນປະສົມປະສານກັບເຄື່ອງມື PCR ໄວສະເພາະຂອງທ່ານແມ່ນຈໍາເປັນ.

    2. ເວລາຖອດຂໍ້ຄວາມແບບປີ້ນກັບກັນຖືກປັບໃຫ້ເໝາະສົມຕາມຄວາມຍາວຂອງຊິ້ນສ່ວນທີ່ຈະຂະຫຍາຍ.ສໍາລັບຊິ້ນສ່ວນທີ່ຍາວກວ່າ, ເວລາການຖອດຂໍ້ຄວາມແບບປີ້ນກັບກັນສາມາດຂະຫຍາຍໄດ້ຢ່າງເຫມາະສົມ.

    3. ອຸນຫະພູມການຂະຫຍາຍ annealing ຄວນໄດ້ຮັບການເພີ່ມປະສິດທິພາບໂດຍອີງໃສ່ມູນຄ່າ Tm ຂອງ primer probe ແລະເງື່ອນໄຂຕົວຈິງຂອງຕິກິຣິຍາ.

    4. ສໍາລັບ primers ທີ່ມີອຸນຫະພູມຕ່ໍາ annealing ຫຼືຍາວກວ່າ 200 bp fragments, ແນະນໍາ 3 ຂັ້ນຕອນ.

    5. ກະລຸນາໃຊ້ພື້ນທີ່ສະເພາະ ແລະທໍ່ທໍ່ກ່ອນ ແລະຫຼັງການຂະຫຍາຍ, ໃສ່ຖົງມື ແລະປ່ຽນພວກມັນເລື້ອຍໆ;ຢ່າເປີດທໍ່ປະຕິກິລິຍາຫຼັງຈາກປະຕິກິລິຍາ PCR ສໍາເລັດເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນການປົນເປື້ອນຂອງຕົວຢ່າງໂດຍຜະລິດຕະພັນ PCR.

    6. ປະສິດທິພາບການນໍາໃຊ້ dUTP ແລະຄວາມອ່ອນໄຫວຕໍ່ກັບ enzyme UNG ແຕກຕ່າງກັນສໍາລັບ genes ເປົ້າຫມາຍທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ດັ່ງນັ້ນຖ້າການນໍາໃຊ້ລະບົບ UNG ນໍາໄປສູ່ການຫຼຸດລົງຂອງຄວາມອ່ອນໄຫວໃນການກວດສອບ, ລະບົບຕິກິຣິຍາຄວນໄດ້ຮັບການປັບແລະເພີ່ມປະສິດທິພາບ.ຖ້າຕ້ອງການການສະຫນັບສະຫນູນດ້ານວິຊາການ, ກະລຸນາຕິດຕໍ່ພວກເຮົາ.

     

    ຂຽນຂໍ້ຄວາມຂອງທ່ານທີ່ນີ້ແລະສົ່ງໃຫ້ພວກເຮົາ