DNS I

DNase I (Deoxyribonuclease I) ແມ່ນ endodeoxyribonuclease ທີ່ສາມາດຍ່ອຍສະຫຼາຍ DNA ດຽວຫຼືສອງສາຍ.ມັນຮັບຮູ້ແລະຕັດພັນທະບັດ phosphodiester ເພື່ອຜະລິດ monodeoxynucleotides ຫຼື oligodeoxynucleotides ດຽວຫຼືສອງສາຍທີ່ມີກຸ່ມຟອສເຟດຢູ່ທີ່ 5′-terminal ແລະ hydroxyl ຢູ່ທີ່ 3′-terminal.ກິດຈະກໍາຂອງ DNase I ແມ່ນຂຶ້ນກັບ Ca2+ ແລະສາມາດເປີດໃຊ້ໄດ້ໂດຍ ion ໂລຫະ divalent ເຊັ່ນ Mn2+ ແລະ Zn2+.5mM Ca2+ ປົກປ້ອງ enzyme ຈາກ hydrolysis.ໃນທີ່ປະທັບຂອງ Mg2+, ເອນໄຊສາມາດຮັບຮູ້ຢ່າງສຸ່ມແລະແຍກສະຖານທີ່ໃດໆໃນສາຍ DNA.ໃນທີ່ປະທັບຂອງ Mn2+, ສາຍສອງຂອງ DNA ສາມາດຖືກຮັບຮູ້ພ້ອມໆກັນແລະຖືກຕັດຢູ່ໃນເກືອບບ່ອນດຽວກັນເພື່ອສ້າງເປັນຊິ້ນ DNA ປາຍຮາບພຽງຫຼືຊິ້ນ DNA ປາຍຫນຽວທີ່ມີ 1-2 nucleotides protruding.

ຊັບສິນຜະລິດຕະພັນ

Bovine Pancreas DNase I ໄດ້ຖືກສະແດງອອກໃນລະບົບການສະແດງອອກຂອງເຊື້ອລາແລະບໍລິສຸດ.

Cອົງປະກອບ

ການຂົນສົ່ງແລະການເກັບຮັກສາ

1. ຄວາມຫມັ້ນຄົງຂອງການເກັບຮັກສາ: – 15℃ ~ -25℃ ສໍາລັບການເກັບຮັກສາ;

2. ສະຖຽນລະພາບການຂົນສົ່ງ: ການຂົນສົ່ງພາຍໃຕ້ຊອງກ້ອນ;

3. ສະຫນອງໃນ: 10 mM Tris-HCl, 2 mM CaCl₂, 50% glycerol, pH 7.6 ທີ່ 25 ℃​.

ນິຍາມຫົວໜ່ວຍ

ຫນ່ວຍຫນຶ່ງແມ່ນຖືກກໍານົດເປັນຈໍານວນເອນໄຊທີ່ຈະທໍາລາຍ 1 µg ຂອງ pBR322 DNA ຢ່າງສົມບູນໃນ 10 ນາທີທີ່ 37 ° C.

ການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບ

RNase:5U ຂອງ DNase I ກັບ 1.6 μg MS2 RNA ສໍາລັບ 4 ຊົ່ວໂມງຢູ່ທີ່ 37 ℃ yields ບໍ່ມີການເຊື່ອມໂຊມຕາມການກໍານົດໂດຍ agarose gel electrophoresis.

ເຊື້ອແບັກທີເຣັຍ Endotoxin:LAL-test, ອີງຕາມການຈີນ Pharmacopoeia IV 2020 edition, gel limit test method, general rule (1143).ປະລິມານ endotoxin ເຊື້ອແບັກທີເຣັຍຄວນຈະເປັນ ≤10 EU/mg.

ຄໍາແນະນໍາສໍາລັບການນໍາໃຊ້

1. ກະກຽມການແກ້ໄຂປະຕິກິລິຍາໃນທໍ່ທີ່ບໍ່ມີ RNase ຕາມອັດຕາສ່ວນທີ່ລະບຸໄວ້ຂ້າງລຸ່ມນີ້:

2.37 ℃ 15 ນາທີ;

3.ຕື່ມການຢຸດຕິກິຣິຍາຢຸດຕິກິຣິຍາ, ແລະຄວາມຮ້ອນຢູ່ທີ່ 65 ℃ສໍາລັບ 10 ນາທີ inactivate DNase I. ຕົວຢ່າງສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ໂດຍກົງສໍາລັບການທົດລອງ transcription ຕໍ່ໄປ.

ບັນທຶກ

1. ໃຊ້ 1U DNase I ຕໍ່ μg ຂອງ RNA, ຫຼື 1U DNase I ສໍາລັບ RNA ຫນ້ອຍກວ່າ 1μg.

2.EDTA ຄວນຖືກເພີ່ມໃສ່ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສຸດທ້າຍຂອງ 5 mM ເພື່ອປົກປ້ອງ RNA ຈາກການຖືກທໍາລາຍໃນລະຫວ່າງການກະຕຸ້ນຂອງເອນໄຊ.