ນິວເຄລຍ Ultra
UltraNuclease ເປັນພັນທຸກໍາທີ່ສ້າງຂື້ນມາຈາກ Serratia marcescens, ເຊິ່ງສາມາດທໍາລາຍ DNA ຫຼື RNA, ທັງສອງສາຍຫຼືສາຍດຽວ, ຮູບແຂບຫຼືວົງພາຍໃຕ້ສະພາບທີ່ກວ້າງຂວາງ, ທໍາລາຍອາຊິດນິວເຄຼຍຢ່າງສົມບູນເຂົ້າໄປໃນ 5'-monophosphate oligonucleotides ທີ່ມີຄວາມຍາວ 35-bases. .ຫຼັງຈາກການດັດແກ້ວິສະວະກໍາພັນທຸກໍາ, ຜະລິດຕະພັນໄດ້ຖືກຫມັກ, ສະແດງອອກ, ແລະ purifiedin Escherichia coli (E. coli), ເຊິ່ງຊ່ວຍຫຼຸດຜ່ອນການຄົ້ນຄ້ວາວິທະຍາສາດຂອງ cell supernatant ແລະ cell lysate, ແຕ່ຍັງປັບປຸງປະສິດທິພາບການຊໍາລະລ້າງແລະການຄົ້ນຄວ້າທີ່ເປັນປະໂຫຍດຂອງທາດໂປຼຕີນ.ມັນຍັງສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ໃນການປິ່ນປົວພັນທຸກໍາ, ການຊໍາລະລ້າງເຊື້ອໄວຣັສ, ການຜະລິດຢາວັກຊີນ, ອຸດສາຫະກໍາການຢາຂອງທາດໂປຼຕີນແລະ polysaccharide ເປັນ reagent ການກໍາຈັດອາຊິດນິວຄລີອິກ residue.
ຄຸນສົມບັດຂອງຜະລິດຕະພັນ
| CAS No. | 9025-65-4 |
| EC No. | |
| ນ້ຳໜັກໂມເລກຸນ | 30kDa |
| ຈຸດ isoelectric | 6.85 |
| ຄວາມບໍລິສຸດຂອງທາດໂປຼຕີນ | ≥99% ( SDS-PAGE & SEC-HPLC) |
| ກິດຈະກໍາສະເພາະ | ≥1.1×106U/mg |
| ອຸນຫະພູມທີ່ດີທີ່ສຸດ | 37°C |
| pH ທີ່ດີທີ່ສຸດ | 8.0 |
| ກິດຈະກໍາ Protease | ລົບ |
| Bioburden | ＜10CFU/100,000U |
| ທາດໂປຼຕີນຈາກເຊລທີ່ເຫຼືອ | ≤10ppm |
| ໂລຫະຫນັກ | ≤10ppm |
| ເຊື້ອແບັກທີເຣັຍ Endotoxin | ＜0.25EU/1000U |
| Storage Buffer | 20mM Tris-HCl, pH 8.0, 2mM MgCl2, 20mM NaCl, 50% Glycerol |
ເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາ
≤0°C ການຂົນສົ່ງ;-25~-15°C ການເກັບຮັກສາ, ອາຍຸ 2 ປີ (ຫຼີກເວັ້ນການ freezing-thawing).
ນິຍາມຫົວໜ່ວຍ
ປະລິມານຂອງເອນໄຊທີ່ໃຊ້ໃນການປ່ຽນແປງມູນຄ່າການດູດຊຶມຂອງ △A260 ໂດຍ 1.0 ພາຍໃນ 30 ນາທີຢູ່ທີ່ 37 ° C, pH 8.0, ທຽບເທົ່າກັບ DNA ຂອງເຊື້ອອະສຸຈິ salmon ທີ່ຍ່ອຍໄດ້ 37μg ໂດຍການຕັດເຂົ້າໄປໃນ oligonucleotides, ໄດ້ຖືກກໍານົດເປັນຫນ່ວຍງານທີ່ມີການເຄື່ອນໄຫວ (U).
ການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບ
ທາດໂປຼຕີນຈາກເຊລທີ່ເຫຼືອ: ຊຸດ ELISA
•ໂປຣຕີນ ສານຕົກຄ້າງ: 250KU/mL UltraNuclease reacted ກັບ substrate ສໍາລັບ 60 ນາທີ, ບໍ່ມີກິດຈະກໍາໃດໄດ້ຖືກກວດພົບ.
•ເຊື້ອແບັກທີເຣັຍ Endotoxin: LAL-Test, Pharmacopoeia of the People's Republic of China Volume 4 (2020 Edition) gel limit test method.ກົດລະບຽບທົ່ວໄປ (1143).
•Bioburden: ຮ້ານຂາຍຢາຂອງສາທາລະນະລັດປະຊາຊົນຈີນ ສະບັບທີ 4 (ສະບັບປີ 2020) — ທົ່ວໄປ
ກົດລະບຽບສໍາລັບການທົດສອບການເປັນຫມັນ (1101), ມາດຕະຖານແຫ່ງຊາດ PRC, GB 4789.2-2016.
•ໂລຫະຫນັກ:ICP-AES, HJ776-2015.
ການດໍາເນີນງານ
ກິດຈະກໍາ UltraNuclease ໄດ້ຖືກຍັບຍັ້ງຢ່າງຫຼວງຫຼາຍເມື່ອຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ SDS ເກີນ 0.1% ຫຼື EDTA
ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສູງກວ່າ 1mM.Surfactant Triton X-100, Tween 20 ແລະ Tween 80 ບໍ່ມີຜົນຕໍ່ນິວເຄລຍ.
ຄຸນສົມບັດໃນເວລາທີ່ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນແມ່ນຢູ່ພາຍໃຕ້ 1.5%.
| ການດໍາເນີນງານ | ການປະຕິບັດທີ່ດີທີ່ສຸດ | ການປະຕິບັດທີ່ຖືກຕ້ອງ |
| ອຸນຫະພູມ | 37℃ | 0-45℃ |
| pH | 8.0-9.2 | 6.0- 11.0 |
| Mg2+ | 1-2 ມມ | 1- 15 ມມ |
| DTT | 0- 100 ມມ | > 100 ມມ |
| 2-Mercaptoethanol | 0- 100 ມມ | > 100 ມມ |
| ທາດໄອອອນໂລຫະ monovalent (Na+, K+ ແລະອື່ນໆ) | 0-20ມມ | 0-200mm |
| PO43- | 0- 10 ມມ | 0- 100 ມມ |
ການນໍາໃຊ້ແລະປະລິມານ
•ເອົາອາຊິດ nucleic exogenous ອອກຈາກຜະລິດຕະພັນວັກຊີນ, ຫຼຸດຜ່ອນຄວາມສ່ຽງຕໍ່ການເປັນພິດຂອງອາຊິດນິວເຄຼຍທີ່ຕົກຄ້າງແລະປັບປຸງຄວາມປອດໄພຂອງຜະລິດຕະພັນ.
• ຫຼຸດຜ່ອນຄວາມໜຽວຂອງທາດແຫຼວທີ່ເກີດຈາກອາຊິດນິວຄລີອິກ, ຫຼຸດເວລາປຸງແຕ່ງ ແລະເພີ່ມຜົນຜະລິດໂປຣຕີນ.
• ເອົາອາຊິດນິວຄລີອິກທີ່ຫໍ່ອະນຸພາກ (ໄວຣັສ, ຮ່າງກາຍລວມ, ແລະອື່ນໆ), ທີ່ເອື້ອອໍານວຍ.
ກັບການປ່ອຍແລະການເຮັດຄວາມສະອາດຂອງອະນຸພາກ.
| ປະເພດການທົດລອງ | ການຜະລິດທາດໂປຼຕີນ | ເຊື້ອໄວຣັສ, ວັກຊີນ | ຢາເມັດ |
| ຈໍານວນຕາລາງ | ນ້ຳໜັກປຽກ 1g (ຖືກລະງັບດ້ວຍ 10ml buffer) | ໝັກ 1 ລິດ supernatant ແຫຼວ | ວັດທະນະທໍາ 1L |
| ປະລິມານຕໍາ່ສຸດທີ່ | 250U | 100U | 100U |
| ປະລິມານທີ່ແນະນໍາ | 2500U | 25000U | 5000U |
•ການປິ່ນປົວນິວເຄລຍສາມາດປັບປຸງການແກ້ໄຂແລະການຟື້ນຕົວຂອງຕົວຢ່າງສໍາລັບຄໍລໍາ chromatography, electrophoresis ແລະການວິເຄາະ blotting.
• ໃນການປິ່ນປົວພັນທຸກໍາ, ອາຊິດນິວຄລີອິກຖືກໂຍກຍ້າຍອອກເພື່ອໃຫ້ໄດ້ໄວຣັສທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບ adeno ທີ່ບໍລິສຸດ.
