Ultra Nuclease GMP-ເກຣດ
ໝາຍເລກແມວ: HC2016A
UltraNuclease GMP-grade ແມ່ນສະແດງອອກແລະບໍລິສຸດໃນ Escherichia coli (E.coli) ໂດຍວິສະວະກໍາພັນທຸກໍາແລະການກະກຽມພາຍໃຕ້ສະພາບແວດລ້ອມ GMP.ມັນສາມາດຫຼຸດຜ່ອນຄວາມຫນືດຂອງ cell supernatant ແລະ cell lysate ໃນການຄົ້ນຄວ້າວິທະຍາສາດ, ເພີ່ມປະສິດທິພາບການເຮັດຄວາມສະອາດທາດໂປຼຕີນແລະເສີມຂະຫຍາຍການຄົ້ນຄ້ວາການເຮັດວຽກຂອງທາດໂປຼຕີນ.ຜະລິດຕະພັນຍັງສາມາດຫຼຸດຜ່ອນການຕົກຄ້າງຂອງອາຊິດນິວຄລີອິກກັບ pg-grade, ປັບປຸງປະສິດທິພາບແລະຄວາມປອດໄພຂອງຜະລິດຕະພັນຊີວະພາບຂອງຄໍາຮ້ອງສະຫມັກລວມທັງການຊໍາລະໄວຣັດ, ການຜະລິດວັກຊີນ, ແລະການຜະລິດຢາໂປຕີນ / polysaccharide.ໃນນອກຈາກນັ້ນ, ຜະລິດຕະພັນຍັງສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອປ້ອງກັນການ clumping ຂອງຈຸລັງ mononuclear ເລືອດ peripheral ຂອງມະນຸດ (PBMC) ໃນການປິ່ນປົວຈຸລັງແລະການພັດທະນາວັກຊີນ.
UltraNuclease ໄດ້ຖືກສະຫນອງໃຫ້ໃນຮູບແບບຂອງ reagent sterilized, eluted ໃນ buffer (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin), ມີລັກສະນະຂອງແຫຼວທີ່ບໍ່ມີສີ, ໂປ່ງໃສ.ຜະລິດຕະພັນນີ້ແມ່ນຜະລິດໂດຍຄວາມຕ້ອງການຂອງຂະບວນການ GMP ແລະສະຫນອງໃຫ້ໃນຮູບແບບຂອງແຫຼວ.
ອົງປະກອບ
UltraNuclease GMP ເກຣດ (250 U/μL)
ເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາ
ຜະລິດຕະພັນໄດ້ຖືກຂົນສົ່ງດ້ວຍກ້ອນແຫ້ງແລະສາມາດເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ -25 ℃ ~ -15 ອົງສາ C ເປັນເວລາສອງປີ.
ຖ້າຜະລິດຕະພັນຖືກເປີດແລະຖືກເກັບໄວ້ໃນ 4 ℃ຫຼາຍກວ່າຫນຶ່ງອາທິດ, ພວກເຮົາແນະນໍາໃຫ້ການກັ່ນຕອງຜະລິດຕະພັນເພື່ອປ້ອງກັນການປົນເປື້ອນຂອງຈຸລິນຊີ.
ຂໍ້ມູນຈໍາເພາະ
| ເຈົ້າພາບການສະແດງອອກ | Recombinant E. coli ກັບ gene UltraNuclease |
| ນ້ຳໜັກໂມເລກຸນ | 26.5 kDa |
| ຈຸດໄຟຟ້າ | 6.85 |
| ຄວາມບໍລິສຸດ | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Storage Buffer | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin |
|
ນິຍາມຫົວໜ່ວຍ | ຄໍານິຍາມຂອງຫນຶ່ງຫນ່ວຍງານກິດຈະກໍາ (U) ແມ່ນປະລິມານຂອງ enzyme ທີ່ໃຊ້ໃນການປ່ຽນຄ່າການດູດຊຶມຂອງ ΔA260 ໂດຍ 1.0 ໃນ 30 ນາທີໃນ 2. 625 mLລະບົບຕິກິຣິຍາທີ່ 37 ℃ກັບ pH ຂອງ 8.0 (ທຽບເທົ່າກັບການຍ່ອຍອາຫານທີ່ສົມບູນຂອງ37 μg salmon ເຊື້ອອະສຸຈິ DNA ເຂົ້າໄປໃນ oligonucleotides). |
ຄໍາແນະນໍາ
1. ຕົວຢ່າງ ຄໍເລັກຊັນ
ຈຸລັງທີ່ຕິດກັນ: ເອົາຂະຫນາດກາງ, ລ້າງຈຸລັງດ້ວຍ PBS, ແລະເອົາ supernatant ອອກ.
ຈຸລັງ Suspension: ລວບລວມຈຸລັງໂດຍການ centrifugation, ລ້າງຈຸລັງດ້ວຍ PBS, centrifuge ຢູ່ 6,000rpm ສໍາລັບ 10 ນາທີ, ເກັບກໍາ pellet ໄດ້.
Escherichia coli: ລວບລວມເຊື້ອແບັກທີເຣັຍໂດຍການ centrifugation, ລ້າງຫນຶ່ງຄັ້ງດ້ວຍ PBS, centrifuge ຢູ່ທີ່ 8,000rpm ສໍາລັບ 5 ນາທີ, ແລະເກັບກໍາ pellet ໄດ້.
2. ການປິ່ນປົວຕົວຢ່າງ
ປິ່ນປົວເມັດຈຸລັງທີ່ເກັບໄດ້ດ້ວຍ lysis buffer ໃນອັດຕາສ່ວນຂອງມະຫາຊົນ (g) ກັບປະລິມານ (mL)1: (10-20), ຫຼືໂດຍວິທີການກົນຈັກຫຼືທາງເຄມີໃສ່ກ້ອນຫຼືໃນອຸນຫະພູມຫ້ອງ (1g ຂອງເມັດຈຸລັງປະກອບດ້ວຍປະມານ.
109 ຈຸລັງ).
3. ການປິ່ນປົວດ້ວຍເອນໄຊ
ເພີ່ມ 1-5mM MgCl ໃສ່ລະບົບຕິກິຣິຍາແລະປັບ pH ເປັນ 8-9.
ຕື່ມ UltraNuclease ຕາມອັດຕາສ່ວນຂອງ 250 Units ເພື່ອຍ່ອຍ 1 g ຂອງເມັດຈຸລັງ, incubate ຢູ່ທີ່ 37 ℃ສໍາລັບການຫຼາຍກ່ວາ 30 ນາທີ.ກະລຸນາເບິ່ງແບບຟອມ "ເວລາຕິກິຣິຍາທີ່ແນະນໍາ" ເພື່ອເລືອກໄລຍະເວລາຂອງການປິ່ນປົວ.
4. ສຸພານຸວົງ ຄໍເລັກຊັນ
Centrifuge ຢູ່ 12,000 rpm ສໍາລັບ 30 ນາທີແລະເກັບກໍາ supernatant ໄດ້.
ຫມາຍເຫດ: ຖ້າຫາກວ່າການແກ້ໄຂແມ່ນອາຊິດຫຼືເປັນດ່າງ, ຫຼືມີຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສູງຂອງເກືອ, ຝຸ່ນ, ຫຼື.denaturants, ກະລຸນາເພີ່ມປະລິມານ enzyme ຫຼືຂະຫຍາຍເວລາການປິ່ນປົວຕາມຄວາມເຫມາະສົມ.
ແນະນຳຕິກິຣິຍາເງື່ອນໄຂons
| ພາລາມິເຕີ | ເງື່ອນໄຂທີ່ດີທີ່ສຸດ | ເງື່ອນໄຂທີ່ມີປະສິດທິພາບ |
| Mg²+ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ | 1-5 ມມ | 1-10 ມມ |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| ອຸນຫະພູມ | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ | 0-100 ມມ | > 0 ມມ |
| ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ Mercaptoethanol | 0-100 ມມ | > 0 ມມ |
| Monovalent Cation Concentration | 0-20 ມມ | 0-150 ມມ |
| ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງຟອສເຟດ | 0-10 ມມ | 0-100 ມມ |
ແນະນຳ ປະຕິກິລິຍາ ເວລາ (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| ປະລິມານ UltraNuclease (ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສຸດທ້າຍ) | ເວລາຕິກິຣິຍາ |
| 0.25 U/ml | > 10 ຊົ່ວໂມງ |
| 2.5 U/ml | >4ຊມ |
| 25 U/ml | 30 ນທ |
ໝາຍເຫດ:
ກະລຸນາໃສ່ PPE ທີ່ຈໍາເປັນ, ເປືອກຫຸ້ມນອກຫ້ອງທົດລອງແລະຖົງມື, ເພື່ອຮັບປະກັນສຸຂະພາບແລະຄວາມປອດໄພຂອງທ່ານ!
