ຕົວຢ່າງການປ່ອຍ Reagent
ຕົວຢ່າງການປ່ອຍ Reagent ແມ່ນສໍາລັບສະຖານະການວິນິດໄສ POCT ໂມເລກຸນ.ສໍາລັບສອງລະບົບຂອງ LAMP amplification ໂດຍກົງແລະ PCR amplification ໂດຍກົງ, ບໍ່ຈໍາເປັນຕ້ອງມີການສະກັດເອົາອາຊິດ nucleic.lysate ດິບຂອງຕົວຢ່າງສາມາດຂະຫຍາຍໄດ້ໂດຍກົງ, ເຊື້ອສາຍເປົ້າຫມາຍສາມາດກວດພົບໄດ້ຢ່າງຖືກຕ້ອງ, ເວລາກວດຫາຕົວຢ່າງສາມາດສັ້ນລົງຕື່ມອີກ, ເຊິ່ງກົງກັບຄວາມຕ້ອງການຂອງໂມເລກຸນ POCT ຢ່າງສົມບູນ.ມັນເຫມາະສົມສໍາລັບ swabs ດັງ, swabs ຄໍແລະປະເພດຕົວຢ່າງອື່ນໆ.ຕົວຢ່າງທີ່ປຸງແຕ່ງສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ໂດຍກົງສໍາລັບການກວດຫາ PCR ຫຼື LAMP ທີ່ມີປະລິມານ fluorescence ໃນເວລາທີ່ແທ້ຈິງ, ແລະຜົນໄດ້ຮັບດຽວກັນກັບວິທີການສະກັດເອົາແບບດັ້ງເດີມສາມາດບັນລຸໄດ້ໂດຍບໍ່ມີການປະຕິບັດການສະກັດເອົາອາຊິດ nucleic ທີ່ສັບສົນ.
ເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາ
ການຂົນສົ່ງແລະເກັບຮັກສາໄວ້ໃນອຸນຫະພູມຫ້ອງ.
ການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບ
ການກວດຫາຫນ້າທີ່ - qPCR ປະລິມານ: ລະບົບ 800μl Sample Release Reagent ໄດ້ຖືກຂະຫຍາຍອອກ.
ກັບ 1000 ສໍາເນົາ Novel Pseudovirus, ຕົວຢ່າງຫນຶ່ງ swab nasal, ຜົນໂຄ້ງການຂະຫຍາຍທີ່ຄ້າຍຄືກັນແລະΔCt ຄ່າພາຍໃນ ± 0.5 Ct.
ຂັ້ນຕອນການທົດລອງres
1. ເອົາ 800 μl Sample Release Reagent ແລະແຜ່ສານ lysis ເຂົ້າໄປໃນທໍ່ຕົວຢ່າງ 1.5 mL.
2. ເອົານໍ້າຢາລ້າງຮູດັງ ຫຼື ຮູຮູຄໍ; ຂັ້ນຕອນການເກັບຕົວຢ່າງຂອງຮູດັງ: ເອົາຜ້າອັດດັງທີ່ຂ້າເຊື້ອແລ້ວເອົາເຂົ້າໄປໃນຮູດັງ, ຄ່ອຍໆເລື່ອນເລິກປະມານ 1.5 ຊຕມ, ໝູນຄ່ອຍໆ 4 ເທື່ອໃສ່ບໍລິເວນຮູດັງເປັນເວລາຫຼາຍກວ່າ 15 ວິນາທີ. , ຈາກນັ້ນເຮັດຊ້ຳໆໃນຮູດັງອື່ນໆດ້ວຍວິທີການເກັບຕົວຢ່າງ swab.Throat swab: ເອົາ swab ທີ່ເປັນໝັນແລ້ວຄ່ອຍໆ, ເຊັດຕ່ອມທໍ່ຮູດັງ ແລະ ຝາກະເພາະປັດສະວະທາງຫຼັງ 3 ເທື່ອ.
3.ວາງ swab ທັນທີໃນທໍ່ເກັບຕົວຢ່າງ.ຫົວ swab ຄວນຖືກຫມູນວຽນແລະປະສົມໃນການແກ້ໄຂການເກັບຮັກສາຢ່າງຫນ້ອຍ 30 ວິນາທີເພື່ອຮັບປະກັນວ່າຕົວຢ່າງຖືກ eluted ຢ່າງເຕັມສ່ວນໃນທໍ່ເກັບຕົວຢ່າງ.
4. Incubation ຢູ່ທີ່ອຸນຫະພູມຫ້ອງ (20 ~ 25℃) ສໍາລັບ 1min, ການກະກຽມຂອງ lysis buffer ແມ່ນສໍາເລັດ.
5. ທັງສອງລະບົບ 25μl RT-PCR ແລະ RT-LAMP ແມ່ນເຂົ້າກັນໄດ້ກັບຈໍານວນ 10μl ຂອງການເພີ່ມແມ່ແບບສໍາລັບການທົດລອງການຊອກຄົ້ນຫາ.
ບັນທຶກ
1. ຈໍານວນຕໍາ່ສຸດທີ່ຂອງຕົວຢ່າງ lysate ໂດຍກົງທີ່ສອດຄ້ອງກັນກັບ swab ດຽວສາມາດປັບໄດ້ເຖິງ 400μl, ເຊິ່ງສາມາດປັບໄດ້ຕາມຄວາມຕ້ອງການໃນການທົດສອບ.
2. ເມື່ອຕົວຢ່າງຖືກປຸງແຕ່ງໂດຍ reagent ການປ່ອຍຕົວຢ່າງ, ແນະນໍາໃຫ້ເຮັດການທົດສອບຂັ້ນຕອນຕໍ່ໄປໄວເທົ່າທີ່ຈະໄວໄດ້, ເວລາລໍຖ້າໄລຍະຫ່າງແມ່ນດີກວ່າ 1 ຊົ່ວໂມງ.
3. pH ຂອງ lysate ຕົວຢ່າງແມ່ນເປັນກົດ, ແລະລະບົບການກວດພົບຈໍາເປັນຕ້ອງມີ buffer ທີ່ແນ່ນອນ.ມັນເຫມາະສົມສໍາລັບການກວດສອບ PCR, RT-PCR, ແລະ LAMP fluorescence ສ່ວນໃຫຍ່ທີ່ມີ pH buffer, ແຕ່ບໍ່ເຫມາະສົມສໍາລັບການກວດຫາສີຂອງ LAMP ໂດຍບໍ່ມີ buffer.
