ຫນຶ່ງຂັ້ນຕອນໄວ RT-qPCR Probe Premix-UNG
ໝາຍເລກແມວ: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) ແມ່ນຊຸດກວດຫາໄວ RT-qPCR ທີ່ອີງໃສ່ probe ເໝາະສຳລັບ PCR ຂະໜາດດຽວ ຫຼື multiplex ໂດຍໃຊ້ RNA ເປັນແມ່ແບບ (ເຊັ່ນ: RNA virus).ຜະລິດຕະພັນນີ້ໃຊ້ Taq DNA Polymerase ລຸ້ນໃຫມ່ທີ່ດັດແປງພູມຕ້ານທານແລະຂັ້ນຕອນດຽວ Reverse Transcriptase, ທີ່ມີ buffer ທີ່ດີທີ່ສຸດສໍາລັບການຂະຫຍາຍໄວ, ເຊິ່ງມີຄວາມໄວການຂະຫຍາຍໄວ, ປະສິດທິພາບການຂະຫຍາຍໃຫຍ່ຂື້ນແລະຄວາມສະເພາະ.ມັນສະຫນັບສະຫນູນການຂະຫຍາຍທີ່ສົມດູນໃນທັງສອງ plex-plex ແລະ multiplex ຂອງຕົວຢ່າງຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຕ່ໍາແລະສູງໃນເວລາສັ້ນໆ.
ອົງປະກອບ
1. 5×RT-qPCR buffer (U+)
2. ການປະສົມຂອງເອນໄຊ (U+)
ໝາຍເຫດ:
ກ.5×RT-qPCR buffer (U+) ລວມມີ dNTP ແລະ Mg2+;
ຂ.Enzyme mix (U+) ປະກອບມີ reverse transcriptase, Hot Start Taq DNA polymerase, RNase inhibitor ແລະ UDG;
ຄ.ໃຊ້ຄໍາແນະນໍາ RNase-Free, ທໍ່ EP, ແລະອື່ນໆ.
ກ່ອນທີ່ຈະໃຊ້, ໃຫ້ປະສົມ 5×RT-qPCR buffer (U+) ຢ່າງລະອຽດ.ຖ້າມີຝົນຫຼັງຈາກເສື່ອມແລ້ວ, ລໍຖ້າໃຫ້ buffer ກັບຄືນສູ່ອຸນຫະພູມຫ້ອງ, ປະສົມແລະລະລາຍ, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນນໍາໃຊ້ຕາມປົກກະຕິ.
ເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາ
ຜະລິດຕະພັນໄດ້ຖືກຂົນສົ່ງດ້ວຍກ້ອນແຫ້ງແລະສາມາດເກັບຮັກສາໄວ້ຢູ່ທີ່ -25 ~ -15 ℃ເປັນເວລາ 1 ປີ.
ຄໍາແນະນໍາ
1. ປະຕິກິລິຍາ ລະບົບ
| ອົງປະກອບ | ປະລິມານ (20 μL ປະຕິກິລິຍາ) |
| 2 ×RT-qPCR buffer | 4μL |
| ປະສົມຂອງເອນໄຊ (U+) | 0.8 ມລ |
| Primer Forward | 0.1 ~ 1.0μM |
| Primer Reverse | 0.1 ~ 1.0μM |
| TaqMan Probe | 0.05~0.25μM |
| ແມ່ແບບ | X μL |
| RNase-Free Water | ເຖິງ 25μL |
ຫມາຍເຫດ: ປະລິມານປະຕິກິລິຍາແມ່ນ 10-50μL.
2. Cycling Protocol (Sມາດຕະຖານ)
| ຮອບວຽນ ຂັ້ນຕອນ | ອຸນຫະພູມ. | ເວລາ | ຮອບວຽນ |
| Reverse Transcription | 55 ℃ | 10 ນທ | 1 |
| ລັກສະນະເບື້ອງຕົ້ນ | 95 ℃ | 30 ວິ | 1 |
| ລັກສະນະ | 95 ℃ | 10 ວິ | 45 |
| ການບີບອັດ/ຂະຫຍາຍ | 60 ℃ | 30 ວິ |
| Cycling Protocol (ໄວ) ຮອບວຽນ ຂັ້ນຕອນ |
ອຸນຫະພູມ. |
ເວລາ |
ຮອບວຽນ |
| Reverse Transcription | 55 ℃ | 5 ນທ | 1 |
| ລັກສະນະເບື້ອງຕົ້ນ | 95 ℃ | 5 ສ | 1 |
| ລັກສະນະ | 95 ℃ | 3 ສ | 43 |
| ການບີບອັດ/ຂະຫຍາຍ | 60 ℃ | 10 ວ |
ໝາຍເຫດ:
ກ.ອຸນຫະພູມການຖອດຂໍ້ຄວາມແບບປີ້ນກັບກັນຢູ່ລະຫວ່າງ 50 ℃ເຖິງ 60 ℃, ການເພີ່ມອຸນຫະພູມຊ່ວຍຂະຫຍາຍໂຄງສ້າງທີ່ສັບສົນແລະແມ່ແບບເນື້ອຫາ CG ສູງ;
ຂ.ອຸນຫະພູມ annealing ທີ່ດີທີ່ສຸດຕ້ອງໄດ້ຮັບການປັບໂດຍອີງໃສ່ຄ່າ Tm ຂອງ primer, ແລະເລືອກໄລຍະເວລາທີ່ສັ້ນທີ່ສຸດສໍາລັບການລວບລວມສັນຍານ fluorescence ໂດຍອີງໃສ່ເຄື່ອງມື PCR ທີ່ໃຊ້ເວລາທີ່ແທ້ຈິງ.
ບັນທຶກ
ກະລຸນາໃສ່ PPE ທີ່ຈໍາເປັນ, ເປືອກຫຸ້ມນອກຫ້ອງທົດລອງແລະຖົງມື, ເພື່ອຮັບປະກັນສຸຂະພາບແລະຄວາມປອດໄພຂອງທ່ານ!
