ໂປຣ
ຜະລິດຕະພັນ
M-MLV Neoscript Reverse Transcriptase HC2004A ຮູບພາບທີ່ໂດດເດັ່ນ
  • M-MLV Neoscript Reverse Transcriptase HC2004A

M-MLV Neoscript Reverse Transcriptase


ໝາຍເລກແມວ: HC2004A

ການຫຸ້ມຫໍ່: 0.1ml / 1ml / 5ml

Neoscript Reverse Transcriptase ແມ່ນ transcriptase ປີ້ນກັບກັນທີ່ໄດ້ຮັບໂດຍການກວດສອບການກາຍພັນຂອງ gene M-MLV ຂອງຕົ້ນກໍາເນີດຂອງເຊື້ອໄວຣັສ leukemia Moloney murine ແລະສະແດງອອກໃນ E.coli.

ລາຍ​ລະ​ອຽດ​ຜະ​ລິດ​ຕະ​ພັນ

ລາຍລະອຽດຜະລິດຕະພັນ

Neoscript Reverse Transcriptase ແມ່ນ transcriptase ປີ້ນກັບກັນທີ່ໄດ້ຮັບໂດຍການກວດສອບການກາຍພັນຂອງ gene M-MLV ຂອງຕົ້ນກໍາເນີດຂອງເຊື້ອໄວຣັສ leukemia Moloney murine ແລະສະແດງອອກໃນ E.coli.ເອນໄຊເອົາກິດຈະກໍາ RNase H, ມີຄວາມທົນທານຕໍ່ອຸນຫະພູມທີ່ສູງຂຶ້ນ, ແລະເຫມາະສົມສໍາລັບການຖອດຂໍ້ຄວາມທີ່ມີອຸນຫະພູມສູງ.ດັ່ງນັ້ນ, ມັນເປັນປະໂຫຍດສໍາລັບການກໍາຈັດຜົນກະທົບທີ່ບໍ່ເອື້ອອໍານວຍຂອງໂຄງສ້າງລະດັບສູງ RNA ແລະປັດໃຈທີ່ບໍ່ສະເພາະຕໍ່ການສັງເຄາະ cDNA, ແລະມີຄວາມຫມັ້ນຄົງສູງແລະຄວາມສາມາດໃນການສັງເຄາະ reverse transcription.enzyme ມີຄວາມຫມັ້ນຄົງສູງແລະຄວາມສາມາດໃນການສັງເຄາະ transcription reverse.


  • ທີ່ຜ່ານມາ:
  • ຕໍ່ໄປ:

  • ອົງປະກອບ

    1.200 U/μL Neoscript Reverse Transcriptase

    2.5 × First-Strand Buffer (ເລືອກໄດ້)

    * 5 × First-Strand Buffer ບໍ່ມີ dNTP, ກະລຸນາເພີ່ມ dNTPs ເມື່ອກະກຽມລະບົບຕິກິຣິຍາ.

     

    ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກທີ່ແນະນໍາ

    1.ຂັ້ນຕອນດຽວ qRT-PCR.

    2.ການກວດຫາເຊື້ອໄວຣັສ RNA.

     

    ເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາ

    -20°C ສໍາລັບການເກັບຮັກສາໃນໄລຍະຍາວ, ຄວນປະສົມໃຫ້ດີກ່ອນທີ່ຈະນໍາໃຊ້, ຫຼີກເວັ້ນການ freeze ເລື້ອຍໆ.

     

    ນິຍາມຫົວໜ່ວຍ

    ໜ່ວຍໜຶ່ງລວມເອົາ 1 nmol ຂອງ dTTP ໃນ 10 ນາທີຢູ່ທີ່ 37°C ໂດຍໃຊ້ poly(A)•oligo(dT)25ເປັນແມ່ແບບ/primer.

     

    ການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບ

    1.ຄວາມບໍລິສຸດ electrophoretic SDS-PAGE ສູງກວ່າ 98%.

    2.ຄວາມອ່ອນໄຫວຂອງການຂະຫຍາຍ, ການຄວບຄຸມ batch-to-batch, ຄວາມຫມັ້ນຄົງ.

    3.ບໍ່ມີກິດຈະກໍານິວເຄລຍ exogenous, ບໍ່ມີ endonuclease exogenous ຫຼື exonuclease ປົນເປື້ອນ

     

    ການຕັ້ງຄ່າປະຕິກິລິຍາສໍາລັບການແກ້ໄຂບັນຫາຕ່ອງໂສ້ປະຕິກິລິຍາທໍາອິດ

    1.ການກະກຽມປະສົມຕິກິຣິຍາ

    ອົງປະກອບ

    ປະລິມານ

    ໂອລິໂກ(dT)12-18 primer

    ຫຼື Primer Random

    ຫຼື Gene Specific Primersb

    50 pmol

    50 pmol (20-100 pmol)

    2 ໂມງແລງ

    10 mM dNTP

    1 μL

    ແມ່ແບບ RNA

    ລວມ RNA≤ 5μg;mRNA≤ 1 μg

    dH ທີ່ບໍ່ມີ RNase2O

    ເຖິງ 10 μL

    ໝາຍເຫດ:a/b: ກະລຸນາເລືອກປະເພດຕ່າງໆຂອງ primers ຕາມຄວາມຕ້ອງການທົດລອງຂອງທ່ານ.

    2.ໃຫ້ຄວາມຮ້ອນທີ່ 65 ອົງສາ C ເປັນເວລາ 5 ນາທີ ແລະ ເຢັນຢ່າງໄວວາໃສ່ນ້ຳກ້ອນເປັນເວລາ 2 ນາທີ.

    3.ຕື່ມອົງປະກອບຕໍ່ໄປນີ້ໃສ່ລະບົບຂ້າງເທິງໃນປະລິມານທັງຫມົດ 20µL ແລະປະສົມຄ່ອຍໆ:

    ອົງປະກອບ

    ປະລິມານ (μL)

    5 × First-Strand Buffer

    4

    Neoscript Reverse Transcriptase (200 U/μL)

    1

    RNase inhibitor (40 U/μL)

    1

    dH ທີ່ບໍ່ມີ RNase2O

    ເຖິງ 20 μL

    4.ກະລຸນາປະຕິບັດຕິກິຣິຍາຕາມເງື່ອນໄຂດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້:

    (1​) ຖ້າ​ຫາກ​ວ່າ Primer Random ໄດ້​ຖືກ​ນໍາ​ໃຊ້​, ຕິ​ກິ​ຣິ​ຍາ​ຄວນ​ຈະ​ໄດ້​ຮັບ​ການ​ປະ​ຕິ​ບັດ​ຢູ່​ທີ່ 25℃​ສໍາ​ລັບ​ການ 10mins​, ແລະ​ຫຼັງ​ຈາກ​ນັ້ນ​ຢູ່​ທີ່ 50℃​ສໍາ​ລັບ 30 ~ 60mins​;

    (2​) ຖ້າ​ຫາກ​ວ່າ Oligo dT ຫຼື primers ສະ​ເພາະ​ໄດ້​ຖືກ​ນໍາ​ໃຊ້​, ຕິ​ກິ​ຣິ​ຍາ​ຄວນ​ຈະ​ໄດ້​ຮັບ​ການ​ປະ​ຕິ​ບັດ​ຢູ່​ທີ່ 50 ℃​ສໍາ​ລັບ​ການ 30 ~ 60 ນາ​ທີ​.

    5.ໃຫ້ຄວາມຮ້ອນຢູ່ທີ່ 95 ℃ ເປັນເວລາ 5 ນາທີເພື່ອເປີດໃຊ້ງານ Neoscript Reverse Transcriptase ແລະຢຸດຕິກິຣິຍາ.

    6.ຜະລິດຕະພັນການຖອດຂໍ້ຄວາມແບບປີ້ນກັບກັນສາມາດນໍາໃຊ້ໄດ້ໂດຍກົງໃນປະຕິກິລິຍາ PCR ແລະປະຕິກິລິຍາ fluorescence PCR ປະລິມານ, ຫຼືເກັບຮັກສາໄວ້ໃນ -20 ℃ເປັນເວລາດົນນານ.

     

    PCR Rການ​ປະ​ຕິ​ບັດ​:

    1.ການກະກຽມປະສົມຕິກິຣິຍາ

    ອົງປະກອບ

    ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ

    10 × PCR Buffer (dNTP ຟຣີ, Mg²+ ຟຣີ)

    dNTPs (10mM ແຕ່ລະ dNTP)

    200 ມມ

    25 ມມ MgCl2

    1-4 ມມ

    Taq DNA Polymerase (5U/μL)

    2-2.5 U

    primer 1 (10 μM)

    0.2-1 ມມ

    primer 2 (10 μM)

    0.2-1 ມມ

    ແມ່ແບບ

    ≤10% First Chain Reaction Solution (2 μL)

    ddH2O

    ເຖິງ 50 μL

    ໝາຍເຫດ:a: ຖ້າສານປະຕິກິລິຍາຕ່ອງໂສ້ທໍາອິດຖືກເພີ່ມຫຼາຍເກີນໄປ, ປະຕິກິລິຍາ PCR ອາດຈະຖືກຍັບຍັ້ງ.

    2.ຂັ້ນຕອນປະຕິກິລິຍາ PCR

    ຂັ້ນຕອນ

    ອຸນຫະພູມ

    ເວລາ

    ຮອບວຽນ

    ກ່ອນການເກີດຜິວໜັງ

    95℃

    2-5 ນາທີ

    1

    ລັກສະນະ

    95℃

    10-20 ວິ

    30-40

    ການຫົດຕົວ

    50-60℃

    10-30 ວິ

    ສ່ວນຂະຫຍາຍ

    72 ℃

    10-60 ວິ

     

    ບັນທຶກ

    1.ທີ່​ເຫມາະ​ສົມ​ສໍາ​ລັບ​ການ​ປັບ​ປຸງ​ອຸນ​ຫະ​ພູມ transcription reverse ໃນ​ລະ​ດັບ​ຂອງ 42 ℃ ~ 55 ℃​.

    2.ມັນມີຄວາມຫມັ້ນຄົງທີ່ດີກວ່າ, ແມ່ນເຫມາະສົມສໍາລັບອຸນຫະພູມສູງ reverse amplification.ນອກຈາກນັ້ນ, ມັນແມ່ນເອື້ອອໍານວຍສໍາລັບການປະສິດທິພາບຜ່ານພາກພື້ນໂຄງສ້າງສະລັບສັບຊ້ອນຂອງ RNA.ນອກຈາກນີ້, ມັນເໝາະສຳລັບການກວດຫາ RT-PCR ແບບ Multiplex fluorescence.

    3.ຄວາມເຂົ້າກັນໄດ້ດີກັບ enzymes ຂະຫຍາຍ PCR ຕ່າງໆແລະເຫມາະສົມກັບປະຕິກິລິຍາ RT-PCR ທີ່ມີຄວາມອ່ອນໄຫວສູງ.

    4.ເຫມາະສໍາລັບຄວາມອ່ອນໄຫວສູງຫນຶ່ງຂັ້ນຕອນ fluorescence ປະລິມານຕິກິຣິຍາ RT-PCR, ປະສິດທິຜົນປັບປຸງອັດຕາການກວດພົບຂອງຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຕ່ໍາຂອງແມ່ແບບ.

    5.ເຫມາະສໍາລັບການກໍ່ສ້າງຫ້ອງສະຫມຸດ cDNA.

     

    ຂຽນຂໍ້ຄວາມຂອງທ່ານທີ່ນີ້ແລະສົ່ງໃຫ້ພວກເຮົາ