2×PCR Master Mix (ບໍ່ມີສີຍ້ອມ)
PCR Master Mix ແມ່ນປະເພດຂອງການແກ້ໄຂເບື້ອງຕົ້ນຂອງ PCR ທໍາມະດາທີ່ພ້ອມທີ່ຈະໃຊ້, ລວມທັງ Taq DNA Polymerase, dNTP mix MgCl2 ແລະ buffer ທີ່ດີທີ່ສຸດ.ໃນລະຫວ່າງການຕິກິຣິຍາ, ພຽງແຕ່ primer ແລະແມ່ແບບສາມາດຖືກເພີ່ມສໍາລັບການຂະຫຍາຍ, ເຊິ່ງຫຼາຍ simplifies ຂັ້ນຕອນການດໍາເນີນງານຂອງການທົດລອງ.ຜະລິດຕະພັນນີ້ປະກອບດ້ວຍ stabilizer ທີ່ດີເລີດແລະສາມາດເກັບຮັກສາໄວ້ໄດ້ 3 ເດືອນຢູ່ທີ່ 4 ℃.ຜະລິດຕະພັນ PCR ມີ 3′-dA protrusion ແລະສາມາດໄດ້ຮັບການ cloned ໄດ້ຢ່າງງ່າຍດາຍເປັນ T vector.
ເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາ
ຜະລິດຕະພັນຄວນໄດ້ຮັບການເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ -25 ℃ ~ -15 ℃ສໍາລັບສອງປີ.
ຂໍ້ມູນຈໍາເພາະ
| ຄວາມຊື່ສັດ (vs.Taq) | 1× |
| ເລີ່ມຕົ້ນຮ້ອນ | No |
| ລົ້ນ | 3′-ກ |
| ໂພລີເມີເຣສ | ທາກ DNA Polymerase |
| ຮູບແບບປະຕິກິລິຍາ | SuperMix ຫຼື Master Mix |
| ຄວາມໄວປະຕິກິລິຍາ | ມາດຕະຖານ |
| ປະເພດຜະລິດຕະພັນ | PCR Master Mix (2×) |
ຄໍາແນະນໍາ
1.ລະບົບປະຕິກິລິຍາ
| ອົງປະກອບ | ຂະໜາດ (μL) |
| ແມ່ແບບ DNA | ເຫມາະສົມ |
| primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | ເຖິງ 50 |
2.ອະນຸສັນຍາການຂະຫຍາຍ
| ຂັ້ນຕອນຮອບວຽນ | ອຸນຫະພູມ (°C) | ເວລາ | ຮອບວຽນ |
| ກ່ອນການເກີດຜິວໜັງ | 94 ℃ | 5 ນາທີ | 1 |
| ລັກສະນະ | 94 ℃ | 30 ວິ | 35 |
| ການຫົດຕົວ | 50-60 ℃ | 30 ວິ | |
| ສ່ວນຂະຫຍາຍ | 72 ℃ | 30-60sec/kb | |
| ສ່ວນຂະຫຍາຍສຸດທ້າຍ | 72 ℃ | 10 ນາທີ | 1 |
ໝາຍເຫດ:
1) ການນໍາໃຊ້ແມ່ແບບ: 50-200 ng DNA genomic;0.1-10 ng plasmid DNA.
2) ມກ2+ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ: ຜະລິດຕະພັນນີ້ມີ 3 mM ຂອງ MgCl2 ທີ່ເຫມາະສົມສໍາລັບປະຕິກິລິຍາ PCR ຫຼາຍທີ່ສຸດ.
3) ອຸນຫະພູມ Annealing: ກະລຸນາເບິ່ງຄ່າ Tm ທາງທິດສະດີຂອງ Primers.ອຸນຫະພູມ annealing ສາມາດກໍານົດ 2-5 ℃ຕ່ໍາກວ່າມູນຄ່າທາງທິດສະດີຂອງ primer ໄດ້.
4) ເວລາຂະຫຍາຍ: ສໍາລັບການກໍານົດໂມເລກຸນ, ແນະນໍາ 30 sec/kb.ສໍາລັບ gene cloning, 60sec/kb ແມ່ນແນະນໍາ.
ບັນທຶກ
1.ເພື່ອຄວາມປອດໄພ ແລະສຸຂະພາບຂອງເຈົ້າ, ກະລຸນາໃສ່ເສື້ອຄຸມຫ້ອງທົດລອງ ແລະຖົງມືທີ່ໃຊ້ແລ້ວຖິ້ມໄດ້.
2.ສໍາລັບການນໍາໃຊ້ການຄົ້ນຄວ້າເທົ່ານັ້ນ!
