Warm Start Bst 2.0 DNA Polymerase (ບໍ່ມີ Glycerol)

Bst DNA polymerase V2 ແມ່ນໄດ້ມາຈາກ Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I, ເຊິ່ງມີກິດຈະກໍາ 5′→3′ DNA polymerase ແລະກິດຈະກໍາການທົດແທນຕ່ອງໂສ້ທີ່ເຂັ້ມແຂງ, ແຕ່ບໍ່ມີກິດຈະກໍາ 5′→3′ exonuclease.Bst DNA Polymerase V2 ເໝາະ ສົມທີ່ສຸດ ສຳ ລັບການເຄື່ອນທີ່ຂອງສາຍ, ການຂະຫຍາຍໄຟສາຍ isothermal (loop mediated isothermal amplification) ແລະການຈັດລໍາດັບຢ່າງໄວວາ.Bst DNA polymerase V2 ເປັນຮຸ່ນທີ່ເລີ່ມຕົ້ນທີ່ຮ້ອນໂດຍອີງໃສ່ Bst DNA polymerase V2 (HC5005A) ທີ່ໄດ້ຮັບໂດຍເຕັກໂນໂລຢີການດັດແປງແບບປີ້ນກັບກັນ, ເຊິ່ງສາມາດຍັບຍັ້ງກິດຈະກໍາ DNA polymerase ຢູ່ໃນອຸນຫະພູມຫ້ອງ, ດັ່ງນັ້ນລະບົບປະຕິກິລິຍາສາມາດດໍາເນີນການແລະສ້າງຢູ່ໃນອຸນຫະພູມຫ້ອງເພື່ອປ້ອງກັນການບໍ່. -specific amplification ແລະປັບປຸງປະສິດທິພາບຕິກິຣິຍາ, ແລະສະບັບນີ້ສາມາດ lyophilized.ນອກຈາກນັ້ນ, ກິດຈະກໍາຂອງມັນຖືກປ່ອຍອອກມາໃນອຸນຫະພູມສູງ, ດັ່ງນັ້ນບໍ່ຈໍາເປັນຕ້ອງມີຂັ້ນຕອນການກະຕຸ້ນແຍກຕ່າງຫາກ.

ອົງປະກອບ

Bst DNA polymerase V2 (ບໍ່ມີ Glycerol) (8U/μL)

ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ

1.LAMP isothermal amplification

2.DNA strand ປະຕິກິລິຍາການຍົກຍ້າຍດຽວ

3.ລໍາດັບ GC ສູງ

4.ການຈັດລໍາດັບ DNA ຂອງລະດັບ nanogram.

ເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາ

ການຂົນສົ່ງພາຍໃຕ້ 0 ° C ແລະຖືກເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ -25 ° C ~ -15 ° C.

ນິຍາມຫົວໜ່ວຍ

ຫນ່ວຍຫນຶ່ງແມ່ນຖືກກໍານົດເປັນຈໍານວນເອນໄຊທີ່ລວມເອົາ 25 nmol ຂອງ dNTP ເຂົ້າໄປໃນວັດສະດຸທີ່ບໍ່ລະລາຍຂອງອາຊິດໃນເວລາ 30 ນາທີທີ່ 65 ° C.

ການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບ

1.ການທົດສອບຄວາມບໍລິສຸດຂອງທາດໂປຼຕີນ (SDS-PAGE):ຄວາມບໍລິສຸດຂອງ Bst DNA polymerase V2 ແມ່ນ ≥99% ຖືກກໍານົດໂດຍການວິເຄາະ SDS-PAGE ໂດຍໃຊ້ການກວດຫາ Coomassie Blue.

2.Endonucleaseກິດຈະກໍາ:Incubation ຂອງຕິກິຣິຍາ 50 μLທີ່ມີຕໍາ່ສຸດທີ່ຂອງ 8 U ຂອງ Bst DNA polymerase V2 ກັບ 1 μg λDNA ສໍາລັບ 16 ຊົ່ວໂມງທີ່ 37 ℃ຜົນໄດ້ຮັບບໍ່ມີການເຊື່ອມໂຊມສາມາດກວດພົບໄດ້ຕາມກໍານົດ.

3.ກິດຈະກໍາ Exonuclease:incubation ຂອງຕິກິຣິຍາ 50 μLທີ່ມີຕໍາ່ສຸດທີ່ຂອງ 8 U ຂອງ Bst DNA polymerase V2 ກັບ 1 μg λ -Hind Ⅲຍ່ອຍ DNA ສໍາລັບ 16 ຊົ່ວໂມງທີ່ 37 ℃ຜົນໄດ້ຮັບບໍ່ມີການເຊື່ອມໂຊມທີ່ກວດພົບຕາມກໍານົດ.

4.ກິດຈະກໍາ Nickase:incubation ຂອງຕິກິຣິຍາ 50 μLທີ່ມີຕໍາ່ສຸດທີ່ຂອງ 8 U ຂອງ Bst DNA polymerase V2 ກັບ 1 μg pBR322 DNA ສໍາລັບ 16 ຊົ່ວໂມງທີ່ 37 ° C ສົ່ງຜົນໃຫ້ບໍ່ມີການເຊື່ອມໂຊມສາມາດກວດພົບໄດ້ຕາມກໍານົດ.

5.ກິດຈະກໍາ RNase:incubation ຂອງຕິກິຣິຍາ 50 μLທີ່ມີຕໍາ່ສຸດທີ່ 8 U ຂອງ Bst DNA polymerase V2 ກັບ 1.6 μg MS2 RNA ສໍາລັບ 16 ຊົ່ວໂມງທີ່ 37 ° C ສົ່ງຜົນໃຫ້ບໍ່ມີການເຊື່ອມໂຊມສາມາດກວດພົບໄດ້ຕາມທີ່ໄດ້ກໍານົດ.

6.E. coliDNA:120 U ຂອງ Bst DNA polymerase V2 ຖືກກວດຫາການປະກົດຕົວຂອງ E. coli genomic DNA ໂດຍໃຊ້ TaqMan qPCR ກັບ primers ສະເພາະສໍາລັບ E. coli 16S rRNA locus.ການປົນເປື້ອນ DNA genomic ຂອງ E. coli ແມ່ນ ≤1 ສໍາເນົາ.

ປະຕິກິລິຍາຂອງໂຄມໄຟ

ໝາຍເຫດ:

1) ກ.SYTOTM 16 ສີຂຽວ (25 ×): ອີງຕາມຄວາມຕ້ອງການໃນການທົດລອງ, ສີຍ້ອມສີອື່ນໆສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ແທນ;

2) ຂ.ການປະສົມ primer: ໄດ້ຮັບໂດຍການປະສົມ 20 µ M FIP, 20 µ M BIP, 2.5 µ M F3, 2.5 µ M B3, 5 µ M LF, 5 µ M LB ແລະປະລິມານອື່ນໆ.

ປະຕິກິລິຍາແລະເງື່ອນໄຂ

1 × HC Bst V2 Buffer, ອຸນຫະພູມ incubation ແມ່ນລະຫວ່າງ 60 ° C ແລະ 65 ° C.

ການກະຕຸ້ນຄວາມຮ້ອນ

 80°C, 20 ນາ​ທີ