RT-LAMP Colormetric Master Mix HCB5204A
ຜະລິດຕະພັນນີ້ປະກອບດ້ວຍ buffer ປະຕິກິລິຍາ, RT-Enzymes Mix (Bst DNA polymerase ແລະ reverse transcriptase ທົນທານຕໍ່ຄວາມຮ້ອນ), lyophilized Protectants ແລະອົງປະກອບຂອງສີຍ້ອມ chromogenic.ການນໍາໃຊ້, ພຽງແຕ່ໃຊ້ Buffer, enzyme ປະຕິກິລິຍາແລະ primer ແມ່ນປະສົມແລະເພີ່ມໃສ່ແມ່ແບບ;ເພີ່ມຕົວປ້ອງກັນ lyophilized ສາມາດກົງ.ມັນໄດ້ຖືກເຊື່ອມຕໍ່ກັບ lyophilizer ແລະ lyophilized, ແລະພຽງແຕ່ primers ແລະ templates ໄດ້ຖືກເພີ່ມເມື່ອນໍາໃຊ້.ຊຸດນີ້ສະຫນອງການກວດສອບສາຍຕາໄວ, ຊັດເຈນຂອງການຂະຫຍາຍ, ເຊິ່ງຕິກິຣິຍາທາງລົບແມ່ນຊີ້ໃຫ້ເຫັນເປັນສີແດງແລະຕິກິຣິຍາໃນທາງບວກແມ່ນສະແດງໂດຍການປ່ຽນແປງເປັນສີເຫຼືອງ.
ອົງປະກອບ
ອົງປະກອບ | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
Loop-mediated Amplification Buffer (ມີສີຍ້ອມ) | 0.96 ມລ | 4.80ມລ×2 | 9.60ມລ×10 |
RT-Enzymes Mix | 270 ມລ | 2.70 ມລ | 2.70ມລ×10 |
ປ້ອງກັນ Lyophilized | 0.96ມລ×2 | 9.60ມລ×2 | 9.60ມລ×20 |
ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ
ສໍາລັບການຂະຫຍາຍ DNA ຫຼື RNA isothermal.
ເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາ
ການຂົນສົ່ງດ້ວຍກ້ອນແຫ້ງ, ເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ -25 ~ -15 ℃.ຫຼີກເວັ້ນການ freeze-thaw ເລື້ອຍໆ, ຜະລິດຕະພັນແມ່ນຖືກຕ້ອງສໍາລັບ 12 ເດືອນ.
ພິທີການ
1.ທາ buffer ຕິກິຣິຍາທີ່ຈະຖືກນໍາໃຊ້ໃນອຸນຫະພູມຫ້ອງ.Vortex ໄລຍະສັ້ນໆຫຼື invert tubes ຫຼາຍຄັ້ງເພື່ອປະສົມຢ່າງລະອຽດ, ຫຼັງຈາກນັ້ນ centrifuge ເພື່ອເກັບກໍາຂອງແຫຼວລົງລຸ່ມຂອງທໍ່.
2.ການກະກຽມລະບົບຕິກິຣິຍາ.ທາດປະສົມນີ້ສາມາດຖືກກະກຽມໃນສອງລະບົບຕິກິຣິຍາ, ການປະສົມປະຕິກິລິຍາຂອງແຫຼວແລະການປະສົມລະບົບ lyophilized.
1) ກະກຽມປະສົມປະຕິກິລິຍາຂອງແຫຼວ
ອົງປະກອບ | ປະລິມານ |
Loop-mediated Amplification Buffer (ມີສີຍ້ອມ) | 10 ມລ |
RT-Enzymes Mix | 2.8 ມລ |
10 × Primer Mixa | 5 ມລ |
ແມ່ແບບ DNA/RNA b | × μL |
ນ້ໍາທີ່ບໍ່ມີນິວເຄລຍ | ສູງເຖິງ 50 μL |
2) ການປະສົມລະບົບ Lyophilization
① ກະກຽມປະສົມ lyophilized
ອົງປະກອບ | ປະລິມານ |
Loop-mediated Amplification Buffer (ມີສີຍ້ອມ) | 10 ມລ |
ປ້ອງກັນ Lyophilized | 20 ມລ |
RT-Enzymes Mix | 2.8 ມລ |
ນ້ໍາທີ່ບໍ່ມີນິວເຄລຍ | ສູງເຖິງ 50 μL |
② Lyophilization: ການປະສົມທີ່ກຽມໄວ້ໄດ້ຖືກ lyophilized ໃນລະບົບ 50μL
③ ກະກຽມປະສົມຕິກິຣິຍາ
ອົງປະກອບ | ປະລິມານ |
ປະສົມ Lyophilized | 1 ຊິ້ນ |
10 × Primer Mixa | 5 ມລ |
ແມ່ແບບ DNA/RNA b | × μL |
ນ້ໍາທີ່ບໍ່ມີນິວເຄລຍ | ສູງເຖິງ 50 μL |
ໝາຍເຫດ:
1) ກ.10 × Primer Mix : 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B;
2) ຂ.DEPC (ການລະລາຍໃນນ້ໍາ) ແມ່ນແນະນໍາສໍາລັບອາຊິດ nucleic templ.
1.ອົບທີ່ອຸນຫະພູມ 65 ອົງສາ C ເປັນເວລາ 30-45 ນາທີ, ເຊິ່ງສາມາດຂະຫຍາຍໄດ້ຕາມຄວາມເໝາະສົມຕາມເວລາປະຕິກິລິຍາປ່ຽນສີ.
2.ອີງຕາມຕາເປົ່າ, ສີເຫຼືອງແມ່ນບວກແລະສີແດງແມ່ນລົບ.
ບັນທຶກ
1.ເກືອອາດຈະປາກົດຢູ່ດ້ານລຸ່ມຂອງທໍ່ buffer, vortex ສັ້ນໆຫຼື invert tubes ຫຼາຍຄັ້ງເພື່ອປະສົມຢ່າງລະອຽດຢູ່ໃນອຸນຫະພູມຫ້ອງ.
2.ອຸນຫະພູມຕິກິຣິຍາສາມາດໄດ້ຮັບການ optimized ລະຫວ່າງ 62 ℃ແລະ 68 ℃ຕາມສະພາບຂອງ primers.
3.ນໍ້າຢາທີ່ຖືກຫຸ້ມຫໍ່ບໍ່ຄວນຖືກອາກາດເປັນເວລາດົນນານ.
4.ປະຕິກິລິຍາການປ່ຽນສີສີແດງແລະສີເຫຼືອງແມ່ນຂຶ້ນກັບການປ່ຽນແປງ pH ຂອງລະບົບຕິກິຣິຍາ, ກະລຸນາຢ່າໃຊ້ສານສະກັດຈາກ Tris nucleic acid, ແນະນໍາໃຫ້ໃຊ້ ddH.2O ອາຊິດ nucleic ເກັບຮັກສາໄວ້;
5.ການທົດລອງຄວນໄດ້ຮັບການມາດຕະຖານ, ລວມທັງການກະກຽມລະບົບຕິກິຣິຍາ, lyophilization, ແລະການປຸງແຕ່ງຕົວຢ່າງແລະຂະບວນການເພີ່ມຕົວຢ່າງ;
6.ເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການປົນເປື້ອນ, ແນະນໍາໃຫ້ກະກຽມລະບົບຕິກິຣິຍາໃນ bench ທີ່ສະອາດທີ່ສຸດ, ໃນອື່ນໆເພີ່ມແມ່ແບບໃສ່ hood fume ຂອງຫ້ອງເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການແຊກແຊງໃນທາງບວກທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງ.