Multiplex qPCR Probe Premix
ໝາຍເລກແມວ: HCB5051A
TaqMan multiplex qPCR Master Mix (Dye Based) ແມ່ນການແກ້ໄຂເບື້ອງຕົ້ນສໍາລັບການຂະຫຍາຍ PCR ປະລິມານ 2 × ໃນເວລາທີ່ແທ້ຈິງທີ່ມີລັກສະນະທີ່ມີຄວາມອ່ອນໄຫວແລະຄວາມສະເພາະສູງ, ເຊິ່ງເປັນສີຟ້າ, ແລະມີຜົນກະທົບຂອງການເພີ່ມຕົວຢ່າງ.ຜະລິດຕະພັນນີ້ເປັນ 2× ທາດປະສົມທາງສ່ວນຫນ້າຂອງການປະສົມທີ່ເຮັດໃຫ້ສູງເຖິງສີ່ປະລິມານ PCR ປະລິມານ fluorescent ໃນຕິກິຣິຍາດຽວໄດ້ດີ.ຜະລິດຕະພັນນີ້ປະກອບດ້ວຍວິທີພູມຕ້ານທານທີ່ດັດແປງພັນທຸກໍາເພື່ອ enzyme Taq ເລີ່ມຕົ້ນຮ້ອນ, ປັບປຸງຄວາມອ່ອນໄຫວແລະການຂະຫຍາຍຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ.ໃນເວລາດຽວກັນ, ຜະລິດຕະພັນນີ້ໄດ້ເພີ່ມປະສິດທິພາບຢ່າງເລິກເຊິ່ງ buffer ຫຼາຍປະຕິກິລິຍາ, ເຊິ່ງສາມາດປັບປຸງປະສິດທິພາບການຂະຫຍາຍຂອງຕິກິຣິຍາແລະສົ່ງເສີມການຂະຫຍາຍທີ່ມີປະສິດທິພາບຂອງແມ່ແບບທີ່ມີຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຕ່ໍາ.ຜະລິດຕະພັນນີ້ສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບ genotyping ແລະການວິເຄາະປະລິມານ multiplex.
ຂໍ້ມູນຈໍາເພາະ
| ເລີ່ມຕົ້ນຮ້ອນ | ການເລີ່ມຕົ້ນຮ້ອນໃນຕົວ |
| ວິທີການກວດຫາ | ການກວດພົບ primer-probe |
| ວິທີການ PCR | qPCR |
| ໂພລີເມີເຣສ | ທາກ DNA polymerase |
| ປະເພດຂອງຕົວຢ່າງ | DNA |
ເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາ
ຜະລິດຕະພັນໄດ້ຖືກຂົນສົ່ງດ້ວຍກ້ອນແຫ້ງແລະສາມາດເກັບຮັກສາໄວ້ຢູ່ທີ່ -25 ~ -15 ℃ເປັນເວລາ 2 ປີ.
ຄໍາແນະນໍາ
1. ປະຕິກິລິຍາລະບົບ
| ອົງປະກອບ | ປະລິມານ (μL) | ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສຸດທ້າຍ |
| 2× TaqMan multiplex qPCR Master Mix | 12.5 | 1× |
| ປະສົມ primer (10 μmol / L) a | × | 0.1 - 0.5 μmol/L |
| ປະສົມ Probe (10 μmol/L)b | × | 50 - 250 nmol/L |
| ສີຍ້ອມຜ້າອ້າງອິງ Rox | 0.5 | 1× |
| ແມ່ແບບ DNA/cDNA | 1-10 | - |
| ddH2O | ເຖິງ 25 | - |
ໝາຍເຫດ:ປະສົມຢ່າງລະອຽດກ່ອນທີ່ຈະນໍາໃຊ້ເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການຟອງຫຼາຍເກີນໄປຈາກການສັ່ນຢ່າງແຂງແຮງ.
ກ.ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ primer: Primer Mix ປະກອບດ້ວຍ primer ຫຼາຍຄູ່, ໂດຍປົກກະຕິແຕ່ລະ primer ມີຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນສຸດທ້າຍຂອງ 0.2 μmol / L ແລະຍັງສາມາດປັບໄດ້ລະຫວ່າງ 0.1 ຫາ 0.5 μmol / L ຕາມຄວາມເຫມາະສົມ.
ຂ.ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ Probe: Probe Mix ປະກອບດ້ວຍຫຼາຍ probes ທີ່ມີສັນຍານ fluorescence ທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ແລະຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງແຕ່ລະ probe ສາມາດປັບໄດ້ລະຫວ່າງ 50 ແລະ 250 nmol / L ອີງຕາມສະຖານະການສະເພາະ.
1.ການອ້າງອິງສີຍ້ອມ Rox: ມັນຖືກນໍາໃຊ້ໃນເຄື່ອງມືຂະຫຍາຍ PCR ໃນເວລາທີ່ແທ້ຈິງເຊັ່ນ: ລະບົບຊີວະພາບທີ່ນໍາໃຊ້ເພື່ອແກ້ໄຂຄວາມຜິດພາດຂອງສັນຍານ fluorescence ທີ່ສ້າງຂຶ້ນລະຫວ່າງນ້ໍາດີ;ຜະລິດຕະພັນນີ້ບໍ່ມີການອ້າງອີງການຍ້ອມສີ Rox.Cas#10200 ແມ່ນແນະນໍາໃຫ້ຖ້າຈໍາເປັນ.
2.ການເຈືອຈາງແມ່ແບບ: qPCR ມີຄວາມອ່ອນໄຫວສູງ, ແລະແນະນໍາໃຫ້ເຈືອຈາງແມ່ແບບສໍາລັບການນໍາໃຊ້.ຖ້າແມ່ແບບແມ່ນການແກ້ໄຂຫຼັກຊັບ cDNA, ປະລິມານແມ່ແບບບໍ່ຄວນເກີນ 1/10 ຂອງປະລິມານທັງຫມົດ.
3.ລະບົບປະຕິກິລິຍາ: 25μL, 30μL ຫຼື 50 μL ແມ່ນແນະນໍາໃຫ້ຮັບປະກັນປະສິດທິຜົນແລະການເຮັດຊ້ໍາອີກຂອງການຂະຫຍາຍພັນທຸກໍາເປົ້າຫມາຍ.
4.ການກະກຽມລະບົບ: ກະລຸນາກະກຽມໃນ bench ທີ່ສະອາດ super, ແລະນໍາໃຊ້ຄໍາແນະນໍາແລະທໍ່ຕິກິຣິຍາໂດຍບໍ່ມີການຕົກຄ້າງ nuclease;ມັນແນະນໍາໃຫ້ໃຊ້ຄໍາແນະນໍາກັບໄສ້ຕອງການກັ່ນຕອງ.ຫຼີກເວັ້ນການປົນເປື້ອນຂ້າມແລະການປົນເປື້ອນ aerosol.
2.ໂຄງການປະຕິກິລິຍາ
| ຂັ້ນຕອນຮອບວຽນ | ອຸນຫະພູມ. | ເວລາ | ຮອບວຽນ |
| Initial-denaturation | 95 ℃ | 5 ນາທີ | 1 |
| ລັກສະນະ | 95 ℃ | 15 ວິນາທີ | 45 |
| ການບີບອັດ/ຂະຫຍາຍ | 60 ℃ | 30 ວິ |
ໝາຍເຫດ:
1.Annealing/Extension: ອຸນຫະພູມ ແລະເວລາສາມາດປັບໄດ້ຕາມຄວາມເໝາະສົມຕາມຄ່າ primer Tm ທີ່ອອກແບບມາ.
2.ການໄດ້ຮັບສັນຍານ fluorescence: ເວລາການໄດ້ຮັບສັນຍານ fluorescence ທີ່ຕ້ອງການສໍາລັບເຄື່ອງມືກວດຫາ qPCR ທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ກະລຸນາກໍານົດຕາມກໍານົດເວລາຕໍາ່ສຸດທີ່.ເວລາຂອງເຄື່ອງມືທົ່ວໄປຈໍານວນຫນຶ່ງແມ່ນຖືກກໍານົດດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້:
20 ວິນາທີ: ລະບົບຊີວະພາບທີ່ນຳໃຊ້ 7700, 7900HT, 7500 ໄວ
31 ວິນາທີ: Applied Biosystems 7300
32 ວິນາທີ: Applied Biosystems 7500
ບັນທຶກ
ກະລຸນາໃສ່ PPE ທີ່ຈໍາເປັນ, ເປືອກຫຸ້ມນອກຫ້ອງທົດລອງແລະຖົງມື, ເພື່ອຮັບປະກັນສຸຂະພາບແລະຄວາມປອດໄພຂອງທ່ານ!
