ເອນໄຊ UDG/UNG
UDG (uracil DNA glycosylase) ສາມາດເລັ່ງ hydrolysis ຂອງ N-glycosidic ເຊື່ອມຕໍ່ລະຫວ່າງຖານ uracil ແລະກະດູກສັນຫຼັງຂອງ້ໍາຕານ - phosphate ໃນ ssDNA ແລະ dsDNA.ມັນສາມາດຄວບຄຸມມົນລະພິດ aerosol ໄດ້ຢ່າງງ່າຍດາຍແລະເຫມາະສົມສໍາລັບລະບົບຊີວະວິທະຍາໂມເລກຸນທົ່ວໄປເຊັ່ນ PCR, qPCR, RT-qPCR ແລະ LAMP.
ຂໍ້ມູນຈໍາເພາະ
ເຈົ້າພາບການສະແດງອອກ | Recombinant E. coliwith uracil DNA glycosylase gene |
ນ້ຳໜັກໂມເລກຸນ | 24. 8kDa |
ຄວາມບໍລິສຸດ | ≥95% (SDS-PAGE) |
ການກະຕຸ້ນຄວາມຮ້ອນ | 95 ℃, 5 ~ 10 ນ |
ນິຍາມຫົວໜ່ວຍ | ຫນຶ່ງຫນ່ວຍ (U) ຖືກກໍານົດເປັນຈໍານວນ enzyme ທີ່ຕ້ອງການເພື່ອ catalyze hydrolysis ຂອງ l μg dU ທີ່ມີ dsDNA ໃນ 30 ນາທີທີ່ 25 ℃. |
ການເກັບຮັກສາ
ຜະລິດຕະພັນຄວນເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ -25 ℃ ~ -15 ອົງສາ C ເປັນເວລາສອງປີ.
ຄໍາແນະນໍາ
1.ການກະກຽມປະສົມປະຕິກິລິຍາ PCR ຕາມລະບົບຕໍ່ໄປນີ້
ອົງປະກອບ | ປະລິມານ (μL) | ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສຸດທ້າຍ |
10×PCR Buffer (Mg²+Plus) | 5 | 1× |
25 mmol/LMgCl | 3 | 1.5 mmol/L |
dUTP (10 mmol/L) | 3 | 0.6 mmol/L |
dCTP/dGTP/dATP/dTTP(10mmol/Leach) | 1 | 0.2 mmol/Leach |
ແມ່ແບບ DNA | X | - |
Primer1 (10μmol/L) | 2 | 0.4 μmol/L |
Primer 2 (10μmol/L) | 2 | 0.4 μmol/L |
Taq DNA Polymerase (5 U/μL) | 0. 5 | 0. 05 U/μL |
Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), 1 U/μL | 1 | 1 U/μL |
ddH₂O | ເຖິງ 50 | - |
ຫມາຍເຫດ: ອີງຕາມຂໍ້ກໍານົດຂອງການທົດລອງ, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນສຸດທ້າຍຂອງ dUTP ສາມາດປັບໄດ້ລະຫວ່າງ 0.2-0.6 mmol/L, ແລະ 0.2 mmol/L dTTP ສາມາດເພີ່ມໄດ້ໂດຍເລືອກ.
2.ຂັ້ນຕອນການຂະຫຍາຍ
ຂັ້ນຕອນຮອບວຽນ | ອຸນຫະພູມ | ເວລາ | ຮອບວຽນ |
ການເສື່ອມສະພາບຂອງແມ່ແບບທີ່ມີ dU | 25℃ | 10 ນາທີ | 1 |
ການເປີດໃຊ້ UDG, ການສ້າງຕົວແບບເບື້ອງຕົ້ນ | 95℃ | 5-10 ນາທີ | 1 |
ລັກສະນະ | 95℃ | 10 ວິ |
30-35 |
ການຫົດຕົວ | 60 ℃ | 20 ວິ | |
ສ່ວນຂະຫຍາຍ | 72 ℃ | 30 ວິນາທີ/kb | |
ສ່ວນຂະຫຍາຍສຸດທ້າຍ | 72 ℃ | 5 ນທ | 1 |
ຫມາຍເຫດ: ໄລຍະເວລາປະຕິກິລິຍາຢູ່ທີ່ 25 ° C ສາມາດປັບໄດ້ພາຍໃນ 5-10 ນາທີຕາມຄວາມຕ້ອງການຂອງການທົດລອງ.
ບັນທຶກ
1.UDG ມີການເຄື່ອນໄຫວຢູ່ໃນ buffers ຕິກິຣິຍາ PCR ສ່ວນໃຫຍ່.
2.Enzymes ຄວນຖືກເກັບໄວ້ໃນຕູ້ນ້ໍາກ້ອນຫຼືໃນອາບນ້ໍາກ້ອນໃນເວລາທີ່ນໍາໃຊ້, ແລະຄວນຈະເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ -20 ° C ທັນທີຫຼັງຈາກການນໍາໃຊ້.
3.ກະລຸນາໃສ່ PPE ທີ່ຈໍາເປັນ, ເປືອກຫຸ້ມນອກຫ້ອງທົດລອງແລະຖົງມື, ເພື່ອຮັບປະກັນສຸຂະພາບແລະຄວາມປອດໄພຂອງທ່ານ!